未知基因KH开放阅读框架真核表达载体的构建及其对K562细胞增殖的影响

何於娟; 张彦; 刘小珊; 马凌娣; 欧一衡; 蒋纪恺

doi:10.13406/j.cnki.cyxb.2004.05.001

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未知基因KH开放阅读框架真核表达载体的构建及其对K562细胞增殖的影响

更新时间：2024-01-17

- 未知基因KH开放阅读框架真核表达载体的构建及其对K562细胞增殖的影响
- Construction of eukaryotic expression vector of open reading frame of unknown KH gene and its effect on proliferation of K562 cell
- 重庆医科大学学报 2004年第5期页码：559-562
- 作者机构：
  
  1. 重庆医科大学基础医学院临床生化教研室
  2. 重庆医科大学临床学院血液科
  3. 重庆市永川市人民医院
  4. 重庆医科大学基础医学院临床生化教研室,重庆,400016
  5. 永川,重庆,402160
- 作者简介：
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目（NO:3 9670 881,30 17115 0 ）
- DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.2004.05.001
  中图分类号： Q781
- 纸质出版日期：2004，
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[1]何於娟,张彦,刘小珊,马凌娣,欧一衡,蒋纪恺.未知基因KH开放阅读框架真核表达载体的构建及其对K562细胞增殖的影响[J].重庆医科大学学报,2004(05):559-562.

HE Yujuan, et al. Construction of eukaryotic expression vector of open reading frame of unknown KH gene and its effect on proliferation of K562 cell[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2004,(5):559-562.
[1]何於娟,张彦,刘小珊,马凌娣,欧一衡,蒋纪恺.未知基因KH开放阅读框架真核表达载体的构建及其对K562细胞增殖的影响[J].重庆医科大学学报,2004(05):559-562. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.2004.05.001.

HE Yujuan, et al. Construction of eukaryotic expression vector of open reading frame of unknown KH gene and its effect on proliferation of K562 cell[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2004,(5):559-562. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.2004.05.001.

摘要

目的 :构建未知基因KH的开放阅读框架（openreadingframe

ORF）的真核表达体系

初步探讨未知基因KH的功能。方法 :采用DNA重组技术将KH基因片段的开放阅读框架（KH -ORF）亚克隆于表达载体 pCl-neoMammalianExpres sionVector

重组为pCI-neo -KH -ORF真核表达体系

脂质体转染K5 6 2细胞

RT -PCR检测目的基因KH的表达。采用体外培养技术

通过 pCI -neo -KH -ORF质粒转染K5 6 2细胞前后的生长曲线和乳酸脱氢酶活性测定观察KH -ORF对K5 6 2细胞增殖速度的影响。结果 :KH -ORF在K5 6 2细胞中获得表达

对细胞增殖速度有明显影响。结论 :KH -ORF表达产物可能是一个与K5 6 2细胞增殖有关的功能蛋白质

KH基因可能是一个具有生物学功能的白血病未知基因

Abstract

Objective:To construct the eukaryotic expression vector of open reading frame of KH gene(KH-ORF)

an unknown gene obtained from K562 cells

and investigate its function.Methods:The KH-ORF cDNA was cleaved from plasmid expression vector cut with the same restriction endonucleases.pCI-KH-ORF

the pGEM-T-easy-KH-ORF with EcoRI and SalI and subcloned into the pCl-neo mammalian recombinant expression plasmid

was transfected into K562 cells with liposome and screened by G418.KH-ORF expression was tested by RT-PCR.The effect of expression product on cell proliferation was tested by growth-curve and LDH detection.Results:KH-ORF was expressed in K562 cells.The effects of increased proliferation were significant.Conclusion:The product of KH-ORF may be a functional protein that is related to the proliferation of K562 cells

and KH gene may be a functional unknown leukemia gene.

关键词

KH基因开放阅读框架真核表达K562细胞增殖

Keywords

KH geneOpen reading frameEukaryotic expressionK562 cellsproliferation

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