敲低miR-375对子痫前期模型滋养细胞增殖、凋亡的影响及机制

崔鑫; 李秋红; 张小学

doi:10.11659/jjssx.02E024023

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敲低miR-375对子痫前期模型滋养细胞增殖、凋亡的影响及机制

基础研究 | 更新时间：2024-11-18

- 敲低miR-375对子痫前期模型滋养细胞增殖、凋亡的影响及机制
- Effects of miR-375 knockdown on the proliferation and apoptosis of trophoblast cells in a preeclampsia model and its mechanism
- 局解手术学杂志 2024年33卷第11期页码：980-984
- 作者机构：
  
  秦皇岛市妇幼保健院产科，河北秦皇岛 066000
- 作者简介：
- 基金信息：
  
  河北省秦皇岛市科技支撑课题计划项目(202301A138)
- DOI：10.11659/jjssx.02E024023
  中图分类号： R714.24+4
- 纸质出版日期：2024-11-25，
  
  收稿日期：2024-02-15，
- 稿件说明：
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崔鑫,李秋红,张小学.敲低miR-375对子痫前期模型滋养细胞增殖、凋亡的影响及机制[J].局解手术学杂志,2024,33(11):980-984.

CUI Xin,LI Qiu-hong,ZHANG Xiao-xue.Effects of miR-375 knockdown on the proliferation and apoptosis of trophoblast cells in a preeclampsia model and its mechanism[J].JOURNAL OF REGIONAL ANATOMY AND OPERATIVE SURGERY,2024,33(11):980-984.
崔鑫,李秋红,张小学.敲低miR-375对子痫前期模型滋养细胞增殖、凋亡的影响及机制[J].局解手术学杂志,2024,33(11):980-984. DOI： 10.11659/jjssx.02E024023.

CUI Xin,LI Qiu-hong,ZHANG Xiao-xue.Effects of miR-375 knockdown on the proliferation and apoptosis of trophoblast cells in a preeclampsia model and its mechanism[J].JOURNAL OF REGIONAL ANATOMY AND OPERATIVE SURGERY,2024,33(11):980-984. DOI： 10.11659/jjssx.02E024023.

摘要

目的

探讨敲低miR-375对子痫前期（PE）滋养细胞模型增殖、凋亡的影响及作用机制。

方法

取人绒毛膜滋养细胞株HTR-8/Svneo，随机分为常氧对照组、PE模型组、miR-NC组和miR-375 inhibitor组。其中，miR-NC组和miR-375 inhibitor组细胞分别转染miR-NC和miR-375 inhibitor；常氧对照组细胞在常氧环境下培养，其余3组细胞均在缺氧条件下培养以建立PE滋养细胞模型。采用RT-PCR检测miR-375的表达，EdU荧光染色、CCK-8实验检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞凋亡情况，Western blot检测YAP1蛋白及凋亡相关蛋白（Bcl-2、caspase-3及Bax蛋白）的表达。双荧光素酶基因实验检测miR-375与YAP1的靶向调控关系。

结果

与常氧对照组比较，PE模型组细胞miR-375表达升高（

0.05），EdU阳性细胞百分比下降（

0.05），细胞增殖能力降低（

0.05），细胞凋亡率升高（

0.05），Bax、caspase-3蛋白表达水平升高（

0.05），YAP1、Bcl-2蛋白表达水平降低（

0.05）。PE模型组和miR-NC组细胞上述各项指标比较差异均无统计学意义（

0.05）。与miR-NC组比较，miR-375 inhibitor组细胞miR-375表达降低（

0.05），EdU阳性细胞百分比升高（

0.05），细胞增殖能力增强（

0.05），细胞凋亡率降低（

0.05），Bax、caspase-3蛋白表达降低（

0.05），YAP1、Bcl-2蛋白表达升高（

0.05）。双荧光素酶报告基因实验显示，miR-375对YAP1具有靶向调控作用（

0.05）。

结论

敲低miR-375可促进PE滋养细胞增殖并抑制细胞凋亡，其作用机制可能与其对YAP1基因的靶向调控有关。

Abstract

Objective

To investigate the effects of miR-375 knockdown on the proliferation and apoptosis of trophoblast cells in preeclampsia （PE） model and its mechanism.

Methods

Human chorionic trophoblast cell line HTR-8/Svneo was randomly divided into the normoxic control group， the PE model group， the miR-NC group， and the miR-375 inhibitor group. Among them， cells in the miR-NC group and miR-375 inhibitor group were transfected with miR-NC and miR-375 inhibitor， respectively；cells in the normoxic control group were cultured in a normoxic enviroment，and cells in the remaining three groups were cultured under hypoxic conditions to establish the PE trophoblast cell model. The expression of miR-375 was detected by RT-PCR， the proliferation of cells was detected by EdU fluorescence staining and CCK-8 assay， the apoptosis of cells was detected by flow cytometry， and the expression of YAP1 protein and apoptosis-related proteins （Bcl-2， caspase-3， and Bax proteins） were detected by Western blot. The target regulation relationship between miR-375 and YAP1 was detected by dual luciferase reporter gene assay.

Results

Compared with the normoxic control group， the PE model group showed an increase in the expression of miR-375 （

0.05）， a decrease in the proportion of EdU-positive cells （

0.05）， a decline in the cell proliferation ability （

0.05）， increases in the apoptosis rate （

0.05） and the expression levels of Bax and caspase-3 proteins （

0.05）， and a decrease in the expression levels of YAP1 and Bcl-2 proteins （

0.05）. There was no significant difference in the above indicators between the PE model group and the miR-NC group （

0.05）. Compared with the miR-NC group， the miR-375 inhibitor group showed a lower expression of miR-375 （

0.05）， an increased percentage of EdU-positive cells （

0.05）， an enhanced cell proliferation ability （

0.05）， a lower apoptosis rate （

0.05）， and a lower expression of Bax and caspase-3 proteins （

0.05）， while with a higher expression of YAP1 and Bcl-2 proteins （

0.05）. The dual luciferase reporter gene assay showed that miR-375 had a targeted regulatory effect on YAP1 （

0.05）.

Conclusion

Knocking down miR-375 can promote the proliferation and inhibit the apoptosis of PE trophoblast cells， and its mechanism may be related to its targeted regulation of YAP1 gene.

关键词

子痫前期miR-375YAP1细胞增殖细胞凋亡

Keywords

preeclampsiamiR-375YAP1cell proliferationcell apoptosis

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