目的　设计和构建人类新基因人内皮高表达脂多糖相关因子 1(endothelium overexpressedlipopolysaccharide as sociatedfactor1

eola1)特异性的小干扰RNA表达载体sieola1

建立eola1下调表达模型

观察eola1下调表达对细胞增殖的影响。方法　设计靶点特异性的寡核苷酸

连接到经BamHⅠ HindⅢ酶切线性化的pSlincer3 .1 H1质粒上 ;转染重组质粒到ECV3 0 4细胞

通过定量RT PCR实验检测靶基因的抑制情况 ;对转染sieola1质粒的细胞进行细胞计数

并应用流式细胞仪观察细胞周期的变化。结果　构建的小RNA干扰质粒sieola1转染ECV3 0 4细胞能够抑制靶基因eola1的表达 ;细胞计数和流式细胞仪检测结果显示eola1表达抑制后

细胞生长周期延长。结论　成功构建了针对eola1基因的siRNA质粒 ;细胞计数和流式细胞仪检测结果初步确认eola1具有抑制ECV3 0 4细胞增殖的作用。