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网络首发:2004-11-30,
纸质出版:2004
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葛晓冬,刘友生,王晓东,王长松,邓军,重组人脂多糖结合蛋白的氨基末端片段在昆虫细胞中的表达、纯化及功能鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(22):0-.
葛晓冬, 刘友生, 王晓东, et al. 重组人脂多糖结合蛋白的氨基末端片段在昆虫细胞中的表达、纯化及功能鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(22).
葛晓冬,刘友生,王晓东,王长松,邓军,重组人脂多糖结合蛋白的氨基末端片段在昆虫细胞中的表达、纯化及功能鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(22):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2004.22.021
葛晓冬, 刘友生, 王晓东, et al. 重组人脂多糖结合蛋白的氨基末端片段在昆虫细胞中的表达、纯化及功能鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(22). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2004.22.021.
目的 以昆虫sf2 1、sf9细胞表达、分泌人源脂多糖结合蛋白的氨基末端片段 (NH LBP)
并初步观察其生物学特性。方法 以昆虫sf2 1和sf9细胞于完全Grace培养基中分别扩增编码人源NH LBP的杆状病毒
再以sf2 1和sf9细胞于SF 90 0Ⅱ无血清培养基中表达NH LBP
并以TALON柱芯对NH LBP进行亲和纯化
此后以Tris Tricine电泳、毛细管电泳、流式细胞分析实验 (flowcytometryanalysis)、TNFa分泌实验的方法鉴定NH LBP的纯度及生物学活性。结果 昆虫sf2 1和sf9细胞均能有效地扩增编码NH LBP的杆状病毒
其中sf9细胞扩增病毒的能力为sf2 1细胞的 1 18倍。sf2 1细胞成功地表达、分泌NH LBP
并经TALON柱芯亲和纯化
其纯度达 98%
NH LBP具有明确的与脂多糖 (LPS)结合的生物学活性
而sf9细胞却不能表达、分泌NH LBP。结论 以昆虫sf2 1细胞分泌表达具有活性人源NH LBP是可行的
昆虫sf9细胞可扩增编码NH LBP的杆状病毒
但不能表达、分泌NH LBP。
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