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网络首发:2002-02-28,
纸质出版:2002
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朱永红,邹全明,人白细胞介素-18在大肠杆菌中的高效表达[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(02):0-.
朱永红, 邹全明. 人白细胞介素-18在大肠杆菌中的高效表达[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(2).
朱永红,邹全明,人白细胞介素-18在大肠杆菌中的高效表达[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(02):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2002.02.029
朱永红, 邹全明. 人白细胞介素-18在大肠杆菌中的高效表达[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(2). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2002.02.029.
目的 在大肠杆菌中实现人IL 18成熟蛋白 (mhIL 18)的高效表达。方法 采用RT PCR由人肝脏Kupffer细胞中扩增mhIL 18基因
构建非融合型原核表达质粒petTT mhIL 18
转化至大肠杆菌DH5α
用IPTG诱导重组蛋白表达
超声裂解细胞提取包涵体
采用SDS PAGE及Westernblot分析重组蛋白的表达
包涵体蛋白经 8mol L尿素溶解
透析复性
ELISA检测重组蛋白诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生IFN γ的能力。结果 所扩增的mhIL 18基因与GenBank公布的序列一到。经IPTG诱导
mhIL 18在大肠杆菌中的表达量占菌体蛋白的 40 %以上
在细胞中以包涵体形式存在
复性的重组蛋白具有诱生IFN γ的能力。结论 mhIL 18可在大肠杆菌中高效表达
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