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网络首发:2002-01-30,
纸质出版:2002
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黄桂君,农江,马壮,钱桂生,李淑萍,陈维中,大鼠γ-干扰素基因转染大鼠肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞的实验研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(01):0-.
黄桂君, 农江, 马壮, et al. 大鼠γ-干扰素基因转染大鼠肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞的实验研究[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(1).
黄桂君,农江,马壮,钱桂生,李淑萍,陈维中,大鼠γ-干扰素基因转染大鼠肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞的实验研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(01):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2002.01.031
黄桂君, 农江, 马壮, et al. 大鼠γ-干扰素基因转染大鼠肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞的实验研究[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(1). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2002.01.031.
目的 构建重组大鼠γ 干扰素真核表达载体
探讨其转染大鼠肺泡巨噬细胞 (AM)和气道上皮细胞的可行性及表达水平。方法 采用RT PCR技术克隆了大鼠γ 干扰素
并将其定向克隆到逆转录病毒载体pLXSN上
构成真核表达重组载体。将重组载体转染培养的AM和气道上皮细胞。用PCR法鉴定重组载体整合在细胞基因组DNA中。并检测细胞培养上清中γ 干扰素浓度和活性。结果 DNA测序证明
构建的重组载体中γ 干扰素的基因方向正确
DNA序列与GeneBank中大鼠的γ 干扰素cDNA序列相同。转染后AM和气道上皮细胞基因组DNA的PCR产物电泳可见转染的重组载体DNA片段条带。pLXSN IFN载体组的AM和气道上皮细胞培养上清中大鼠γ 干扰素浓度和活性显著高于pLXSN空载体组 (P 0 .0 1)。结论 本研究构建的大鼠γ 干扰素重组表达载体可成功地转染大鼠AM和气道上皮细胞
整合入基因组DNA
并分泌有活性的γ 干扰素
为进一步的体内基因转染研究奠定基础
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