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网络首发:2001-02-28,
纸质出版:2001
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吴国明,黄桂君,钱桂生,姚伟,人肺癌细胞NHE-1基因部分正调控序列的克隆[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2001,23(02):0-.
吴国明, 黄桂君, 钱桂生, et al. 人肺癌细胞NHE-1基因部分正调控序列的克隆[J]. Journal of Army Medical University, 2001, 23(2).
吴国明,黄桂君,钱桂生,姚伟,人肺癌细胞NHE-1基因部分正调控序列的克隆[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2001,23(02):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2001.02.002
吴国明, 黄桂君, 钱桂生, et al. 人肺癌细胞NHE-1基因部分正调控序列的克隆[J]. Journal of Army Medical University, 2001, 23(2). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2001.02.002.
目的 克隆人肺癌细胞Na+ /H+ 交换泵 1(NHE 1)基因上游正调控序列部分
为进一步将该片段导入肺癌细胞株
竞争性结合转录因子
达到抑制细胞内NHE 1基因的表达奠定基础。方法 采用PCR技术从人肺癌A5 49细胞基因组中扩增长约170bp的NHE 1基因调控序列中起正调控作用的片段。在上、下游引物的 5’ 端带上BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点。然后将该片段连接到pUC18载体上。最后对产生的重组子进行酶切、PCR和测序鉴定。结果 经酶切及PCR鉴定
所克隆的目的片段大约为180bp
而DNA测序证实克隆并插入到载体中的片段为目的片段
长度为 168bp
与报道的序列比较缺失 2个t。结论 本实验已成功地克隆了人肺癌细胞NHE 1基因调控序列中正调控序列片段。
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