人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定

陈兵; 刘为纹; 房殿春; 府伟灵; 杨金亮; 杨仕明; 周子成

doi:10.16016/j.1000-5404.1999.10.013

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人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定

更新时间：2026-01-09

- 人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定
- 人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定
- 陆军军医大学学报 1999年21卷第10期
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- DOI：10.16016/j.1000-5404.1999.10.013
  中图分类号： R730.4
- 网络首发：1999-10-30，
  
  纸质出版：1999
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陈兵,刘为纹,房殿春,府伟灵,杨金亮,杨仕明,周子成,人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),1999,21(10):0-.

陈兵, 刘为纹, 房殿春, et al. 人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 1999, 21(10).
陈兵,刘为纹,房殿春,府伟灵,杨金亮,杨仕明,周子成,人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),1999,21(10):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.1999.10.013

陈兵, 刘为纹, 房殿春, et al. 人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 1999, 21(10). DOI： 10.16016/j.1000-5404.1999.10.013.

摘要

目的：建立一种亲和纯化人端粒酶的手段。方法：酶切鉴定人端粒酶RNA（hTR）质粒，所切下的hTRcDNA片段用生物素标记后与链霉亲和秦琼脂糖珠耦连，用高端粒酶活性的胃肿瘤细胞提取液与之反应，利用端粒酶核糖核蛋白的特性，形成链霉亲和秦琼脂糖珠-生物素标记hTRcDNA－hTR-端粒酶蛋白组份复合物，核酸解离液洗脱后获得亲和纯人端粒酶。其活性用宝灵曼公司端粒酶试剂盒检测，定量利用BeckmanDU－640检测仪进行。结果：酶切鉴定的结果与hTR质粒图谱吻合。生物素hTRcDNA与链霉亲和素琼脂精珠耦连量为31．71μg，耦连率为98．38％。纯化后的端粒酶活性保持良好，相对纯化程度为108．46。结论：本研究中建立的方法是一种可行的端粒酶纯化手段，可用于人端粒酶的深入研究。

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