卡氏肺孢子胸腺嘧啶核苷酸合酶基因siRNA表达载体的构建和鉴定

唐滢浍; 姚云清; 谭燕; 王莉妮; 李文桂; 刘成伟; 陈雅棠

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卡氏肺孢子胸腺嘧啶核苷酸合酶基因siRNA表达载体的构建和鉴定

基础研究 | 更新时间：2024-01-17

- 卡氏肺孢子胸腺嘧啶核苷酸合酶基因siRNA表达载体的构建和鉴定
- Construction and identification of plasmid vector of short interfering RNA on pneumocystis carinii thymidylate synthase gene
- 重庆医科大学学报 2009年34卷第7期页码：877-879
- 作者机构：
  
  重庆医科大学附属第一医院感染科
- 作者简介：
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金资助项目（30471512）;重庆市医学科技计划项目（04-2-100）
- DOI：
  中图分类号： R346;R531.5
- 纸质出版日期：2009，
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[1]唐滢浍,姚云清,谭燕,王莉妮,李文桂,刘成伟,陈雅棠.卡氏肺孢子胸腺嘧啶核苷酸合酶基因siRNA表达载体的构建和鉴定[J].重庆医科大学学报,2009,34(07):877-879.

TANG Ying-hui, et al. Construction and identification of plasmid vector of short interfering RNA on pneumocystis carinii thymidylate synthase gene[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2009,34(7):877-879.
[1]唐滢浍,姚云清,谭燕,王莉妮,李文桂,刘成伟,陈雅棠.卡氏肺孢子胸腺嘧啶核苷酸合酶基因siRNA表达载体的构建和鉴定[J].重庆医科大学学报,2009,34(07):877-879. DOI：

TANG Ying-hui, et al. Construction and identification of plasmid vector of short interfering RNA on pneumocystis carinii thymidylate synthase gene[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2009,34(7):877-879. DOI：

摘要

目的:构建和鉴定大鼠卡氏肺孢子（Pneumocystis carinii

PC）胸腺嘧啶核苷酸合酶（Thymidylate synthase

TS）基因的siRNA（Short interfering RNA）表达载体。方法:人工合成针对PCTS基因的1对shRNA（Short hairpin RNA）序列并定向克隆到空载体pTZU6+1上

构建siRNA表达重组质粒pPC-TS

并采用双酶切产物凝胶电泳和基因测序法鉴定。结果:酶切电泳和基因测序鉴定得到的产物与预期的目的基因一致。结论:成功构建卡氏肺孢子胸腺嘧啶核苷酸合酶基因siRNA表达载体。

Abstract

Objective:To construct and identify a plasmid vector of short interfering RNA(siRNA) on pneumocystis carinii (PC) thymidylate synthase. Methods: Short hairpin RNA oligonucleotides of thymidylate synthase were chemically synthesized and inserted into plasmid vector pTZU6+1 after annealing. The recombinant plasmid

pPC-TS

transformed into E. coil. TOP10 and amplified

was digested by restriction endonucleases Hind Ⅲ and EcoR Ⅰ and identified by gel electrophoresis and DNA sequencing. Results: Gel electrophoresis and DNA sequencing showed that the recombinant plasmid containing the correct and full shRNA oligonucleotide. Conclusion:The siRNA plasmid

pPC-TS

was constructed successfully.

关键词

卡氏肺孢子胸腺嘧啶核苷酸合酶基因siRNA表达载体

Keywords

Pneumocystis cariniiThymidylate synthase genesiRNA expression plasmid

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