浏览全部资源
扫码关注微信
纸质出版日期:2005,
扫 描 看 全 文
罗福康[] 郑红[] 沈大斌[]. 趋化因子MIP-3α的克隆与表达[J]. 局解手术学杂志, 2005,(2):1.
罗福康[] 郑红[] 沈大斌[]. 趋化因子MIP-3α的克隆与表达[J]. 局解手术学杂志, 2005,(2):1. DOI:
DOI:
目的 克隆人趋化因子MIP-3α基因,表达并初步纯化MIP-3α融合蛋白。方法从扁桃体中提取总RNA,再进行RT-PCR,扩增MIP-3a成熟蛋白基因,并在5’和3’分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点,通过这两个酶切位点重组于pET32a(+)载体上,转化E.coli.DH5α,筛选阳性克隆,酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性,缺失突变获得MIP-3α天然蛋白表达载体pET32a(+)/MIP-3α,SDS-PAGE分析其表达,Westernblot验证融合蛋白。大量表达并初步纯化MIP-3α融合蛋白。结果 成功克隆了MIP-3α基因,表达并初步纯化得到MIP-3α融合蛋白。结论构建的MIP-3α硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式表达MIP-3α硫氧还蛋白。
MIP-3α 融合表达 载体 Western blot 蛋白纯化
0
浏览量
1
下载量
CSCD
关联资源
相关文章
相关作者
相关机构