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纸质出版日期:2007,
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汪云[] 肖岚[] 吕凤林[]. HPV18E2蛋白CTL表位多肽的构建与表达[J]. 局解手术学杂志, 2007,(6):1.
汪云[] 肖岚[] 吕凤林[]. HPV18E2蛋白CTL表位多肽的构建与表达[J]. 局解手术学杂志, 2007,(6):1. DOI:
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目的分析HPV18E2蛋白的CTL表位
合成并纯化这些表位多肽
构建表达HPV18E2蛋白的靶细胞
检验特异性CTL对靶细胞的杀伤效果
为进一步研制人乳头瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基础。方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板
利用PCR方法扩增HPV18E2 DNA片段
将HPV18E2 DNA与加强绿色荧光质粒(pIRES2-EGFP)重组构建重组质粒(pIRES2-HPV18E2-EGFP)。用酶切电泳及测序检查质粒重组后序列正确性。重组质粒转染Hela细胞。51^Cr释放实验评估CTL杀伤能力。结果克隆重组质粒pIRES2-HPV18E2-EGFP酶切后显示的酶切图谱与预期相同
而且测序验证插入片段全序列无改变。转染并用G418筛选后
在荧光显微镜下可见绿色荧光细胞的表达。三条候选多肽特异性杀伤能力分别为60.00%、71.29%和80.00%。结论三条备选肽段都具有明显的杀伤效应
均为HPV18E2蛋白的有效CTL表位。[著者文摘]
人乳头瘤病毒18型 E2基因 多肽
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