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贵州医科大学组织学与胚胎学教研室,贵州,贵阳,550004
纸质出版日期:2016,
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严会文, 陈剑英, 高杰, 等. 大鼠角膜缘干细胞分离培养及其横向分化能力初探[J]. 局解手术学杂志, 2016,(4).
严会文, 陈剑英, 高杰, 等. 大鼠角膜缘干细胞分离培养及其横向分化能力初探[J]. 局解手术学杂志, 2016,(4). DOI:
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目的 体外分离培养大鼠角膜缘干细胞(LSCs),并探讨在细胞因子EGF、bFGF联合RA作用下,LSCs体外横向分化为神经干细胞样细胞的能力。方法 体外分离培养LSCs并进行p63免疫组化鉴定。〖JP2〗在原代培养的LSCs中,设立2个诱导组进行分化实验,诱导组1加入EGF(20 ng/mL)和bFGF(10 ng/mL),诱导组2加入EGF(20 ng/mL)、bFGF(10 ng/mL)和RA(25 ng/mL),〖JP〗同时设立空白对照组。培养7 d后,收集各组细胞作神经元标志物Nestin的免疫组化检测及阳性细胞计数,收集各组细胞蛋白做蛋白免疫印迹分析各组Nestin蛋白表达情况,相关数据作统计学分析。结果 免疫组化结果显示体外分离培养的LSCs p63呈阳性,诱导分化的2组细胞Nestin呈阳性表达,阳性率分别为(77.01±6.32)%和(84.01±5.43)%,诱导组2的诱导率高于诱导组1,差异具有统计学意义(P<0.05);对照组细胞Nestin呈阴性表达。蛋白免疫印迹结果显示,2个诱导组在240 kDa处可见Nestin蛋白条带,诱导组2 Nestin蛋白表达略高于诱导组1,对照组未见Nestin蛋白条带。结论 成功分离培养大鼠LSCs,在细胞因子EGF、bFGF作用下,LSCs具有横向分化为神经干细胞样细胞的能力,同时联合使用RA有促进LSCs向神经干细胞样细胞分化的作用。
大鼠角膜缘干细胞神经干细胞样细胞表皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子全反式维甲酸
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