[摘 要] 目的 构建CXCR4基因慢病毒过表达载体并对其进行包装、鉴定。方法 首先设计合成引物，采用PCR法扩增目的基因CXCR4，将目的基因与酶切线性化的载体进行定向交换，成功构建重组载体慢病毒表达载体pGC-FU-CXCR4，将其产物转化大肠杆菌感受态细胞。对培养出的克隆先进行菌落PCR鉴定，再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析，最后将获得的病毒载体共同转染293T细胞，收集病毒颗粒，并采用Real time PCR法测定病毒滴度。结果 PCR鉴定结果显示扩增的目的基因已成功插入pGC-FU载体，Western Blot结果显示得到的片段与理论大小相符，阳性克隆测序结果与目的基因序列一致，说明重组慢病毒载体的插入序列完全正确。结论 本实验成功构建了CXCR4慢病毒表达载体，并成功对慢病毒进行了包装及病毒滴度测定。