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阿丽米热?伊力哈木, 卡米力江?买买提明, 美尔瓦提, 等. 脂肪间充质干细胞外泌体通过miR-145抑制小鼠增生性瘢痕血管生成及纤维增生[J]. 局解手术学杂志, 2022,(10):870.
Alimire?Yilihamu, Kamilijiang?Maimaitiming, Meierwati, et al. Adipose-derived mesenchymal stem cell exosomes inhibit hypertrophic scar angiogenesis and fibrogenesis in mice via miR-145[J]. null, 2022,(10):870.
阿丽米热?伊力哈木, 卡米力江?买买提明, 美尔瓦提, 等. 脂肪间充质干细胞外泌体通过miR-145抑制小鼠增生性瘢痕血管生成及纤维增生[J]. 局解手术学杂志, 2022,(10):870. DOI:
Alimire?Yilihamu, Kamilijiang?Maimaitiming, Meierwati, et al. Adipose-derived mesenchymal stem cell exosomes inhibit hypertrophic scar angiogenesis and fibrogenesis in mice via miR-145[J]. null, 2022,(10):870. DOI:
目的 探究miR-145在脂肪间充质干细胞(ADSCs)来源外泌体(Exo)抑制小鼠增生性瘢痕(HS)血管生成与纤维增生中的作用。方法 从人皮下脂肪组织分离培养ADSCs,经成脂或成骨分化诱导培养基诱导后,采用油红O染色或茜素红染色检测细胞成脂、成骨分化能力,流式细胞术测定ADSCs表面标志物CD29、CD34、CD45、CD90和CD105表达;使用含miR-145过表达的慢病毒感染ADSCs后提取Exo,透射电镜观察颗粒物的形态,纳米颗粒跟踪分析仪分析粒径大小,Western blot检测Exo表面标志性蛋白Alix、Tsg101和CD81表达,实时荧光定量PCR检测miR-145的相对表达量。将40只SPF级健康雄性C57/BL6小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、Exo组和miR-145-Exo组,每组10只,除对照组外,其余3组小鼠均构建HS模型,Exo组和miR-145-Exo组小鼠分别在背部伤口处皮下注射100 μL Exo与转染miR-145的Exo,对照组和模型组注射等体积PBS;14 d后处死各组小鼠并切取瘢痕组织,HE染色和Masson染色观察皮肤组织病理学变化及胶原沉积情况,免疫组化染色测定血管内皮生长因子(VEGF)表达,Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)及Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)的蛋白表达水平。结果 分离的细胞经茜素红染色和油红O染色后,可见细胞内沉积钙盐,有明显脂滴形成,CD105、CD90、CD29呈阳性表达,而CD34、CD45呈阴性表达,说明成功分离获得ADSCs;透射电镜观察到颗粒物为球形囊泡,粒径峰值约为128 nm,Exo标志性蛋白Alix、Tsg101和CD81均呈阳性表达,说明成功分离到Exo,且经miR-145慢病毒转染的ADSCs来源Exo中miR-145相对表达水平升高(P<0.05)。相较于模型组,Exo组和miR-145-Exo组的小鼠皮肤组织损伤减轻,HS区域减少,且真皮层变薄,胶原沉积减少,组织纤维化得到缓解,VEGF阳性表达率降低,α-SMA、TGF-β1、CollagenⅠ及CollagenⅢ的蛋白表达水平均下调,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Exo组比较,miR-145-Exo组小鼠皮肤组织病理学表现改善更明显,纤维化缓解更明显,真皮层厚度更小,VEGF阳性表达率更低,α-SMA、TGF-β1、CollagenⅠ及CollagenⅢ的蛋白表达水平均下调更明显,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-145能够促进ADSCs来源Exo对小鼠HS形成的抑制作用,该作用与抑制瘢痕血管生成、纤维增生以及相关因子TGF-β1、α-SMA、CollagenⅠ及CollagenⅢ的表达有关。
增生性瘢痕miR-145脂肪间充质干细胞外泌体血管生成纤维化
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