目的 探讨通过泛Caspase抑制剂ZVADFMK抑制凋亡通路对体外培养玻璃化冷冻未成熟卵母细胞（VIOs）的DNA完整性和发育潜能的影响。方法 取200只雌性ICR小鼠未成熟卵丘—卵母细胞复合体（COCs）。实验Ⅰ：将未成熟COCs分为阴性对照组（FOs组，n=31，新鲜COCs）、阳性对照组（HPOs组，n=32，过氧化氢暴露COCs约3 h）、2 h VIOs组（n=31，玻璃化复苏COCs 2 h）、18 h VIOs组（n=32，玻璃化复苏COCs 18 h），探讨玻璃化冷冻对未成熟卵母细胞凋亡通路的影响。实验Ⅱ：将未成熟COCs分为VIOs（-/-）组（n=36，未加入ZVADFMK）、VIOs（+/-）组（n=37，仅在玻璃化冷冻复苏培养基中添加ZVADFMK）和VIOs（+/+）组（n=34，在玻璃化冷冻复苏培养基和复苏后培养基中均添加ZVADFMK），复苏后孵育18 h进行染色，探讨ZVADFMK对凋亡标志物［未成熟卵母细胞DNA片段化（TUNEL阳性卵母细胞百分比）、Caspase活性］的影响。实验Ⅲ：将未成熟COCs分为FOs组（n=130）、VIOs（-/-）组（n=129）和VIOs（+/+）组（n=128），分组操作同上，分析ZVADFMK对VIOs体外发育潜能的影响。结果 实验Ⅰ结果显示，HPOs组、18 h VIOs组未成熟卵母细胞DNA片段化比例高于FOs组（P<0.05）；18 h VIOs组未成熟卵母细胞DNA片段化比例高于2 h VIOs组（P=0.023），低于HPOs组（P=0.004）；HPOs组、2 h VIOs组和18 h VIOs组Caspase活性均高于FOs组（P=0.001），但是HPOs组、2 h VIOs组和18 h VIOs组Caspase活性比较，差异无统计学意义（P>0.05）。实验Ⅱ结果显示，与VIOs（-/-）组相比，VIOs（+/-）组未成熟卵母细胞DNA片段化比例较低（P=0.007）；VIOs（+/+）组未成熟卵母细胞DNA片段化比例和Caspase活性低于VIOs（+/-）组和VIOs（-/-）组（P<0.001），但VIOs（+/-）组和VIOs（-/-）组Caspase活性比较差异无统计学意义（P=0.588）。实验Ⅲ结果显示，VIOs（+/+）组成熟率、受精率与FOs组和VIOs（-/-）组比较差异无统计学意义（P>0.05），但VIOs（+/+）组和VIOs（-/-）组闭锁率高于FOs组（P<0.001）；VIOs（-/-）组和VIOs（+/+）组5～8细胞、9～16细胞胚胎发育率均低于FOs组（P<0.001）；在胚胎发育后期，VIOs（-/-）组和VIOs（+/+）组均无囊胚形成，与FOs组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 玻璃化冷冻提高了VIOs的凋亡标志物水平，而Z-VAD-FMK能够抑制DNA损伤和Caspase活性，但其可能并不是胚胎发育的决定因素。