目的 探讨下调microRNA-10b(miR-10b)对小鼠脂肪干细胞（ADSCs）成骨分化的影响。方法 分离培养小鼠ADSCs，对其进行细胞形态学及流式细胞术鉴定；应用脂质体稳定转染法转染小鼠ADSCs，将转染miR-10b inhibitor、si-CEBPα及miR-10b inhibitor+si-CEBPα的ADSCs依次设为miR-10b inhibitor组、si-CEBPα组及miR-10b inhibitor+si-CEBPα组；同时将上述对应的阴性对照序列转染入ADSCs中，分别记为miR-NC组、si-NC组及miR-NC+si-NC组，正常对照组（control组）为无任何特殊处理的ADSCs；采用RT-PCR法检测转染后ADSCs中miR-10b的表达；生物信息学预测miR-10b与CEBPα的靶向关系，并采用双荧光素酶基因报告实验、实时荧光定量PCR及Western blot验证两者的靶向关系；利用茜素红染色及碱性磷酸酶（ALP）活性检测实验明确miR-10b对小鼠ADSCs成骨分化的影响及CEBPα在其中的作用。结果 与control组和miR-NC组相比，miR-10b inhibitor组小鼠ADSCs中miR-10b的表达显著较低(P<0.05)；双荧光素酶基因报告实验、RT-PCR和Western blot实验结果表明，miR-10b可在小鼠ADSCs中靶向调控CEBPα基因的表达，且与miR-NC组相比，miR-10b inhibitor组ADSCs中CEBPα的mRNA及蛋白表达均显著增加（P<0.05）；茜素红染色及ALP活性检测结果表明，与control组和miR-NC组相比，miR-10b inhibitor组ADSCs细胞形成的矿化结节及ALP活性均显著增加（P<0.05）。功能挽救实验证实，在小鼠ADSCs细胞中同时转染沉默CEBPα的siCEBPα及miR-10b inhibitor后，miR-NC+si-NC组和miR-10b inhibitor+si-CEBPα组ADSCs细胞形成的矿化结节与ALP活性均较siNC+miR-10b inhibitor组低（P<0.05），且前2组之间无明显差异（P>0.05）。结论 在小鼠ADSCs中，下调miR-10b通过靶向调控CEBPα的表达促进脂肪干细胞的成骨分化。