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Online First:30 September 2004,
Published:2004
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段小军,杨柳,董世武,周跃,唐康来,胡鸢,人HIF1α基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(18):0-.
段小军, 杨柳, 董世武, et al. 人HIF1α基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(18).
段小军,杨柳,董世武,周跃,唐康来,胡鸢,人HIF1α基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(18):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2004.18.011
段小军, 杨柳, 董世武, et al. 人HIF1α基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(18). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2004.18.011.
目的 构建人缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)基因重组逆转录病毒载体
并观察其对NIH3T3细胞感染效率。方法 采用基因工程技术
经过 2次亚克隆将HIF 1α基因片段克隆至含IRES EGFP逆转录病毒载体上
鉴定后用脂质体法转染PT67细胞进行包装、扩增
最后用重组逆转录病毒感染NIH3T3细胞。其中采用PCR方法对重组载体进行鉴定
利用绿色荧光蛋白作为报告基因
对病毒滴度和感染效率进行检测。结果 酶切鉴定及PCR结果与HIF 1α基因重组逆转录病毒载体的预期结果一致
病毒滴度达 ( 1 4× 10 6pfu/ml)
并对NIH3T3细胞有强感染能力。结论 应用基因工程技术
成功构建了含人HIF 1α基因重组逆转录病毒载体
为应用于治疗性血管生成创造了条件
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