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Online First:30 April 2003,
Published:2003
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胡承香,顾长国,朱旭东,李磊,SELEX实验中核酸-蛋白复合物分离方法对富集库亲和力的影响[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2003,25(08):0-.
胡承香, 顾长国, 朱旭东, et al. SELEX实验中核酸-蛋白复合物分离方法对富集库亲和力的影响[J]. Journal of Army Medical University, 2003, 25(8).
胡承香,顾长国,朱旭东,李磊,SELEX实验中核酸-蛋白复合物分离方法对富集库亲和力的影响[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2003,25(08):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2003.08.012
胡承香, 顾长国, 朱旭东, et al. SELEX实验中核酸-蛋白复合物分离方法对富集库亲和力的影响[J]. Journal of Army Medical University, 2003, 25(8). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2003.08.012.
目的 比较SELEX实验中
核酸 蛋白复合物分离技术的差异对筛选富集库亲和力的影响。方法 以 β 转化生长因子Ⅱ型受体为靶目标
采用不同技术路线从ssDNA随机库中获取亲和富集库 :技术路线 1
靶目标预先被吸附到 96孔微量滴定板后
再进行筛选
从滴定板上洗脱结合核酸 ;技术路线 2
溶液中筛选、硝酸纤维膜截留核酸 蛋白复合物
从膜上回收结合核酸 ;通过膜结合测定、凝胶阻滞测定实验检测筛选富集库对靶目标的亲和力。结果 经 4轮筛选后
技术路线 1来源的富集库与初始随机库相似
对靶目标无亲和力 ;而技术路线 2来源富集库对靶目标的亲和力较初始随机库有显著提高。结论 SELEX实验中
溶液中筛选、膜截留结合核酸的技术路线与固 液相筛选、固相中直接获取结合核酸的途径相比较
前一种方法更容易富集到与靶目标结合的目的序列
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