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Online First:30 November 2002,
Published:2002
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任少强,黄跃生,张家平,许艳丽,人表皮干细胞的分离和鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(11):0-.
任少强, 黄跃生, 张家平, et al. 人表皮干细胞的分离和鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(11).
任少强,黄跃生,张家平,许艳丽,人表皮干细胞的分离和鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(11):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2002.11.040
任少强, 黄跃生, 张家平, et al. 人表皮干细胞的分离和鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(11). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2002.11.040.
目的 探索一种分离人表皮干细胞的新途径
为组织工程皮肤的构建提供种子细胞。方法 以基底细胞作常规细胞培养 ;采用分类技术并结合表皮干细胞的特性 ;免疫细胞化学S P法鉴定。结果 用中性蛋白酶和胰酶消化可分离基底细胞
(1~2 )× 10 4/ml的基底细胞接种于以 3T3为滋养层的培养瓶内
以含EGF等因子的DMEM为培养液
2d后细胞开始增殖
一周许去除滋养层
10~ 12d可传代。异硫氰酸酯荧光素 (FITC)标记的基底细胞经流式细胞仪分选及IV型胶原 2 0min内的粘附后获得一些圆形、大小较一致的细胞。以鼠抗人K19的单抗为一抗
免疫细胞化学S P法呈棕黄色阳性反应
证实分离出的细胞为表皮干细胞。结论 通过荧光激活细胞分类和IV型胶原的粘附可分离出表皮干细胞
为组织工程皮肤的研究打下基础
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