人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建

郑育声; 谢琪璇; 潘善培; 芦春斌; 肖銮娟

doi:10.16016/j.1000-5404.2002.06.037

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人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建

更新时间：2026-01-09

- 人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建
- Journal of Army Medical University Vol. 24, Issue 6, (2002)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2002.06.037
  CLC： R392
- Online First：30 June 2002，
  
  Published：2002
- 稿件说明：
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郑育声,谢琪璇,潘善培,芦春斌,肖銮娟,人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(06):0-.

郑育声, 谢琪璇, 潘善培, et al. 人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(6).
郑育声,谢琪璇,潘善培,芦春斌,肖銮娟,人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(06):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2002.06.037

郑育声, 谢琪璇, 潘善培, et al. 人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(6). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2002.06.037.

摘要

目的　用基因工程技术克隆人巨细胞病毒 (Humancytomegalovirus

HCMV)中抗原性较强的蛋白片段—gp5 2C末端和pp15 0C末端的DNA序列

插入pPIC9K质粒

构建适于酵母表达系统的重组表达质粒。方法　根据人巨细胞病毒糖蛋白gp5 2和磷酸蛋白pp15 0C末端的cDNA序列

设计出 2对引物。利用PCR的方法

以病毒培养液上清为模板

进行二轮PCR扩增

把两个目的基因串联在一起

将所得的DNA片段经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后用T4连接酶与pPIC9K质粒进行连接

然后导入大肠杆菌DH5α

筛选出阳性转化子

并用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果　从人巨细胞病毒培养液上清中扩增出目的基因

PCR反应和双酶切鉴定结果与预期相符。结论　重组表达质粒成功地克隆了目的基因片段

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