合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究

王思雄; 熊鸿燕; 李莉

doi:10.16016/j.1000-5404.2002.04.015

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合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究

更新时间：2026-01-09

- 合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究
- Journal of Army Medical University Vol. 24, Issue 4, (2002)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2002.04.015
  CLC： R373
- Online First：30 April 2002，
  
  Published：2002
- 稿件说明：
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王思雄,熊鸿燕,李莉,合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(04):0-.

王思雄, 熊鸿燕, 李莉. 合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(4).
王思雄,熊鸿燕,李莉,合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(04):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2002.04.015

王思雄, 熊鸿燕, 李莉. 合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(4). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2002.04.015.

摘要

目的　观察人工合成的反义寡核苷酸 (ASON)、三螺旋结构寡核苷酸 (TFO)分别对人甲肝病毒 (HAV) 5′非编码区和鸭乙肝病毒 (DHBV) DNAX C区目标基因序列特异结合效应及受影响因素作用的变化。方法　在设定条件下

将人工合成的ASON和TFO与目标基因片断混合反应

采用电泳转移印迹技术观察特异结合产物及其产量。结果　所设计的ASON与TFO能与目标基因片段直接特异结合 ;在结合缓冲液中

ASON与目标片段的结合最佳比例是 2 5～ 5 0∶1

TFO与目标片段的结合最佳比例是 60 0∶1;在最适加入剂量比例下

结合反应 60min即有大量TFO的复合物形成

复合物产量随作用时间延长而增加

180～ 2 40min时结合产物完全稳定形成。但ASON的结合复合物大量形成需要 180～ 2 40min。结论　本试验所设计的ASON和TFO能与HAV和DHBV的目标基因序列发生特异的结合

ASON和TFO的加入剂量和反应作用时间对特异结合产物的形成有明显影响

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