链置换扩增技术的影响因素研究

蒋天伦; 府伟灵; 张波; 陈鸣; 张雪; 赵树铭

doi:10.16016/j.1000-5404.2002.01.018

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链置换扩增技术的影响因素研究

更新时间：2026-01-09

- 链置换扩增技术的影响因素研究
- Journal of Army Medical University Vol. 24, Issue 1, (2002)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2002.01.018
  CLC： R346
- Online First：30 January 2002，
  
  Published：2002
- 稿件说明：
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蒋天伦,府伟灵,张波,陈鸣,张雪,赵树铭,链置换扩增技术的影响因素研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(01):0-.

蒋天伦, 府伟灵, 张波, et al. 链置换扩增技术的影响因素研究[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(1).
蒋天伦,府伟灵,张波,陈鸣,张雪,赵树铭,链置换扩增技术的影响因素研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2002,24(01):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2002.01.018

蒋天伦, 府伟灵, 张波, et al. 链置换扩增技术的影响因素研究[J]. Journal of Army Medical University, 2002, 24(1). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2002.01.018.

摘要

目的　探索限制酶、聚合酶、缓冲体系和DTT等对链置换扩增 (SDA)实验的影响

以期在商品化试剂条件下组建SDA系统。方法　以结核菌IS61 1 0序列为扩增对象设计SDA引物

利用商品化的BsoBI和exo Bst为实验用酶建立SDA实验系统。对比在不同BsoBI、exo Bst浓度条件下SDA产物的电泳条带亮度来观察限制酶、聚合酶对SDA效率的影响 ;对比SDA在pH 7.6的磷酸盐缓冲液和以Tris HCl为缓冲体系的NEBuffer2、ThermoPolBuffer和EcoPolBuffer中的产物电泳条带的方法来观察不同缓冲体系对SDA效率的影响 ;对比加入DTT和不加DTT时SDA产物的电泳条带亮度来观察DTT对SDA效率的影响。结果　①在 0 .1～ 0 .4U μl浓度范围内

SDA的扩增率与BsoBI含量正相关

而 0 .8U μlBsoBI反而使SDA受到抑制。②在 0 .0 8～ 0 .3 2U μl浓度范围内exo Bst用量对SDA的扩增能力没有显著影响 ;③SDA可以在pH 7.6的磷酸盐缓冲液和ThermoPolBuffer中进行

而不能在NEBuffer2和EcoPolBuffer中进行 ;④DTT对SDA的扩增率和特异性都没有显著影响。结论　以上实验结果表明在商品化试剂条件下可以构建SDA系统

并得到良好的扩增效果

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