应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库

李靖; 韩本立; 黄桂君; 钱桂生; 徐晓霞; 杨彤翰; 梁平; 陈杰

doi:10.16016/j.1000-5404.2001.06.034

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应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库

更新时间：2026-01-09

- 应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库
- Journal of Army Medical University Vol. 23, Issue 6, (2001)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2001.06.034
  CLC： R735.7
- Online First：30 June 2001，
  
  Published：2001
- 稿件说明：
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李靖,韩本立,黄桂君,钱桂生,徐晓霞,杨彤翰,梁平,陈杰,应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2001,23(06):0-.

李靖, 韩本立, 黄桂君, et al. 应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库[J]. Journal of Army Medical University, 2001, 23(6).
李靖,韩本立,黄桂君,钱桂生,徐晓霞,杨彤翰,梁平,陈杰,应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2001,23(06):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2001.06.034

李靖, 韩本立, 黄桂君, et al. 应用抑制消减杂交技术构建肝癌差异表达基因消减cDNA文库[J]. Journal of Army Medical University, 2001, 23(6). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2001.06.034.

摘要

目的　构建肝癌及癌旁肝组织差异表达基因的消减cDNA文库。方法　采用新近建立的抑制消减杂交方法

以肝癌组织及癌旁肝组织作为对比材料

分离肝癌组织中差异表达基因的cDNA片段

将其与T载体进行T/A连接构建文库

将连接产物用电穿孔法转化大肠杆菌进行文库扩增后

随机挑取 1 0 0个白色克隆用菌落PCR进行鉴定。结果　扩增消减cDNA文库获得 30 0 0余个白色阳性克隆

随机挑取 1 0 0个白色克隆用PCR进行扩增

95%的克隆中均有 1 0 0～ 6 0 0bp的插入片段

这些片段可能是肝癌差异表达基因的cDNA片段。结论　用SSH法及T/A克隆技术成功构建了肝癌与癌旁肝组织差异表达基因消减cDNA文库

该消减cDNA文库的建立为进一步筛选、克隆肝癌差异表达的新基因奠定了基础。

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