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Online First:30 June 2001,
Published:2001
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王洛夫,江军,方玉华,靳风烁,靳文生,雄激素受体反义RNA逆转录病毒载体的构建及其鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2001,23(06):0-.
王洛夫, 江军, 方玉华, et al. 雄激素受体反义RNA逆转录病毒载体的构建及其鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2001, 23(6).
王洛夫,江军,方玉华,靳风烁,靳文生,雄激素受体反义RNA逆转录病毒载体的构建及其鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2001,23(06):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2001.06.008
王洛夫, 江军, 方玉华, et al. 雄激素受体反义RNA逆转录病毒载体的构建及其鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2001, 23(6). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2001.06.008.
目的 构建雄激素受体 (AR)反义RNA逆转录病毒载体pL AR SN并进行包装和鉴定。方法 PCR扩增ARcDNA片段并将之反向插入到逆转录病毒载体pLXSN
用脂质体法转染PA31 7细胞
提取转染细胞基因组DNA和培养上清中重组逆转录病毒RNA
用PCR和RT PCR法进行鉴定
NIH 3T3细胞测定病毒滴度。结果 限制性内切酶分析证明pL AR SN含有反向插入的ARcDNA目的片段 ;培养上清中病毒滴度为 2 .34× 1 0 5 CFU/ml
PCR和RT PCR分别从转染细胞基因组DNA和培养上清中的重组逆转录病毒RNA中扩增出了插入的目的片段。结论 成功构建了AR反义RNA逆转录病毒载体并包装出了高滴度的重组逆转录病毒。
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