人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

黄桂君; 吴国明; 张青; 钱桂生

doi:10.16016/j.1000-5404.2000.06.012

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人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

更新时间：2026-01-09

- 人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建
- Journal of Army Medical University Vol. 22, Issue 6, (2000)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2000.06.012
  CLC： R734.2
- Online First：30 June 2000，
  
  Published：2000
- 稿件说明：
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黄桂君,吴国明,张青,钱桂生,人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2000,22(06):0-.

黄桂君, 吴国明, 张青, et al. 人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建[J]. Journal of Army Medical University, 2000, 22(6).
黄桂君,吴国明,张青,钱桂生,人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2000,22(06):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2000.06.012

黄桂君, 吴国明, 张青, et al. 人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建[J]. Journal of Army Medical University, 2000, 22(6). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2000.06.012.

摘要

目的　构建人肺癌细胞Na+/H+交换泵 1(Na+/H+exchanger 1

NHE 1)基因的反义表达载体

为将来能在体内应用抑制NHE 1基因表达的肿瘤治疗奠定基础。方法　采用PCR技术从人肺癌A5 49细胞基因组中克隆出长为 45 4bp的NHE 1基因外显子部分序列

在上、下游引物的 5’ 端带上BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点。然后将该片段反向插入逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点。最后对产生的重组子进行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。结果　经琼脂糖凝胶电泳鉴定

所克隆的目的片段大约为 46 7bp

并成功地连接到pLXSN载体上

而DNA测序证实克隆并插入到载体中的片段为目的片段。结论　本实验已成功地克隆了NHE 1的目的片段

并将其反向插入到pLXSN中

构建了NHE 1反义表达载体pNHE 1

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