人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶C端片段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备

叶治家; 程天民; 江智红; 李伯良

doi:10.16016/j.1000-5404.2000.02.001

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人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶C端片段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备

更新时间：2026-01-09

- 人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶C端片段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备
- Journal of Army Medical University Vol. 22, Issue 2, (2000)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2000.02.001
  CLC： R394.3
- Online First：29 February 2000，
  
  Published：2000
- 稿件说明：
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叶治家,程天民,江智红,李伯良,人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶C端片段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2000,22(02):0-.

叶治家, 程天民, 江智红, et al. 人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶C端片段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备[J]. Journal of Army Medical University, 2000, 22(2).
叶治家,程天民,江智红,李伯良,人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶C端片段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2000,22(02):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2000.02.001

叶治家, 程天民, 江智红, et al. 人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶C端片段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备[J]. Journal of Army Medical University, 2000, 22(2). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2000.02.001.

摘要

目的 :为了表达人ACATC端片段并制备其抗体。方法 :将编码人ACAT羧基端包含第二跨膜(463 550氨基酸残基)的cDNA片断克隆至不同的大肠杆菌表达载体中

构建了系列表达质粒

并在多种大肠杆菌中进行了表达研究。结果 :在详细探索表达条件的基础上

经温敏诱导

成功地在大肠杆菌AR68中表达了N端融合ProteinABCdomain的人ACAT羧基末端包含第二个跨膜区的片段

表达量约20mg/L菌液。通过优化纯化条件

经Sepharose4B IgG亲和层析柱分离纯化得到表达产物

并制备获得其阳性抗血清。结论 :这些工作为进一步表达完整的ACAT蛋白、研究ACAT基因表达调控及其结构与功能的关系奠定了基础。

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