目的分析HPV18E2蛋白的CTL表位

合成并纯化这些表位多肽

构建表达HPV18E2蛋白的靶细胞

检验特异性CTL对靶细胞的杀伤效果

为进一步研制人乳头瘤病毒18型（HPV18）基因工程疫苗打下基础。方法以重组质粒（pBR322-HPV18）为模板

利用PCR方法扩增HPV18E2 DNA片段

将HPV18E2 DNA与加强绿色荧光质粒（pIRES2-EGFP）重组构建重组质粒（pIRES2-HPV18E2-EGFP）。用酶切电泳及测序检查质粒重组后序列正确性。重组质粒转染Hela细胞。51^Cr释放实验评估CTL杀伤能力。结果克隆重组质粒pIRES2-HPV18E2-EGFP酶切后显示的酶切图谱与预期相同

而且测序验证插入片段全序列无改变。转染并用G418筛选后

在荧光显微镜下可见绿色荧光细胞的表达。三条候选多肽特异性杀伤能力分别为60.00%、71.29%和80.00%。结论三条备选肽段都具有明显的杀伤效应

均为HPV18E2蛋白的有效CTL表位。[著者文摘]