柴胡皂苷A通过调控NF-κB和STAT6信号通路影响M1/M2型巨噬细胞的分化和功能

崔昭; 束雅婷; 雷凡; 彭美玉

doi:10.16016/j.2097-0927.202506038

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柴胡皂苷A通过调控NF-κB和STAT6信号通路影响M1/M2型巨噬细胞的分化和功能

基础医学 | 更新时间：2025-09-28

- 柴胡皂苷A通过调控NF-κB和STAT6信号通路影响M1/M2型巨噬细胞的分化和功能
- Saikosaponin A affects differentiation and function of M1/M2 macrophages by regulating NF-κB and STAT6 signaling pathways
- 陆军军医大学学报 2025年47卷第18期页码：2197-2210
- 作者机构：
  
  山东第二医科大学，山东省高等学校免疫微环境与炎症性疾病研究特色实验室，山东潍坊
- 作者简介：
  
  彭美玉， E-mail：pmy-107@163.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金面上项目(81972695);应用基础研究项目(2021)
- DOI：10.16016/j.2097-0927.202506038
  中图分类号： R285.5;R329.28;R331.144
- 收稿日期：2025-06-12，
  
  修回日期：2025-08-28，
  
  录用日期：2025-09-02，
  
  纸质出版日期：2025-09-30
- 稿件说明：
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崔昭，束雅婷，雷凡，等.柴胡皂苷A通过调控NF-κB和STAT6信号通路影响M1/M2型巨噬细胞的分化和功能［J］.陆军军医大学学报，2025，47（18）：2197-2210.DOI：10.16016/j.2097-0927.202506038.

CUI ZHAO，SHU YATING，LEI FAN，et al.Saikosaponin A affects differentiation and function of M1/M2 macrophages by regulating NF-κB and STAT6 signaling pathways［J］.J Army Med Univ，2025，47（18）：2197-2210.DOI：10.16016/j.2097-0927.202506038.
崔昭，束雅婷，雷凡，等.柴胡皂苷A通过调控NF-κB和STAT6信号通路影响M1/M2型巨噬细胞的分化和功能［J］.陆军军医大学学报，2025，47（18）：2197-2210.DOI：10.16016/j.2097-0927.202506038. DOI：

CUI ZHAO，SHU YATING，LEI FAN，et al.Saikosaponin A affects differentiation and function of M1/M2 macrophages by regulating NF-κB and STAT6 signaling pathways［J］.J Army Med Univ，2025，47（18）：2197-2210.DOI：10.16016/j.2097-0927.202506038. DOI：

摘要

目的

研究柴胡皂苷A（saikosaponin A，SSA）对小鼠骨髓源性巨噬细胞（bone marrow derived macrophage， BMDM）M1/M2型巨噬细胞分化、凋亡和功能的影响，并探究其分子机制。

方法

体外诱导BMDM分别向M1/M2型巨噬细胞分化，并同时加入SSA处理后：CCK-8检测BMDM、M1/M2型巨噬细胞的活性；倒置荧光显微镜观察M1/M2型巨噬细胞形态；流式细胞术（flow cytometry， FCM）和ELISA法检测M1/M2型巨噬细胞表面标志物和细胞因子水平；实时荧光定量PCR（real-time fluorescent quantitative PCR， qPCR）检测IL-6、TNF-α、精氨酸酶-1（arginase-1， Arg-1）的mRNA水平；FCM检测腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球颗粒的能力；免疫组织荧光染色（immunofluorescence，IF）和Western blot检测SSA调控M1/M2型巨噬细胞的分子机制。

结果

SSA浓度在10.0 mg/L范围内对细胞活性无明显影响，SSA浓度15.0 mg/L时，M1/M2型巨噬细胞活性均受到明显抑制（

0.01）；10.0 mg/L SSA处理后的M1/M2型巨噬细胞形态发生变化，M1型巨噬细胞出现纺锤状或不规则形，少数细胞具有伪足，部分细胞边界不清；M2型巨噬细胞部分变为类圆形或者不规则形（

0.001），边界不清楚。SSA处理后BMDM分化为M1/M2型巨噬细胞的比例均显著降低（

0.05），且M1型巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α的水平和其mRNA水平均显著降低（

0.05），但M2型巨噬细胞分泌Arg-1和其mRNA水平均显著升高（

0.05）。SSA可降低腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球颗粒的能力（

0.01），且具有浓度依赖性。SSA可降低M1型巨噬细胞磷酸化核转录因子-κB（phosphorylation of NF-kappaB， p-NF-κB）（

0.01），提高M2型巨噬细胞磷酸化信号转导和转录激活因子6（phosphorylation of signal transducer and activator of transcription 6， p-STAT6）（

0.05）。

结论

SSA可能通过调控NF-κB和STAT6信号通路来影响M1/M2型巨噬细胞的分化和功能。

Abstract

Objective

To investigate the effect of Saikosaponin A (SSA) on the differentiation

apoptosis and function of mouse bone marrow derived macrophages (BMDM)-derived M1/M2 macrophages

and to explore its molecular mechanism.

Methods

BMDM was induced to differentiate into M1/M2

macrophages

in vitro

and SSA was added at the same time: CCK-8 assay was used to detect the viability of BMDM and M1/M2 macrophages. The morphology of M1/M2 macrophages was observed by inverted fluorescence microscopy. Flow cytometry (FCM) and ELISA were used to detect the levels of surface markers and cytokines in M1/M2 macrophages. Real-time fluorescent quantitative PCR (qPCR) was used to detect the mRNA levels of IL-6

TNF-α and arginase-1 (Arg-1). FCM was used to detect the phagocytosis of peritoneal macrophages to fluorescent microsphere particles. Immunofluorescence (IF) assay and Western blotting were used to detect the molecular mechanism of SSA regulating M1/M2 macrophages.

Results

No significant effect on viability of M1/M2 macrophages was observed at SSA concentration of 10.0 mg/L

and obvious inhibition was seen at a concentration of 15.0 mg/L (

0.01). Treatment of 10.0 mg/L SSA induced obvious morphologic changes in M1/M2 macrophages

with M1 macrophages in irregular shape

a few having pseudopods

and some showing unclear boundaries; while some M2 macrophages presenting round or irregular (

0.001) with unclear boundaries. SSA treatment also resulted in significantly decreased proportion of M1/M2 macrophages after BMDM differentiation (

0.05)

with reduced contents of IL-6 and TNF-α secreted by M1 macrophages and their mRNA levels (

0.05)

but increased secretion of Arg-1 and mRNA levels by M2 macrophages (

0.05). SSA treatment also inhibited the phagocytosis ability of peritoneal macrophages to fluorescent microsphere particles (

0.01) in a concentration-dependent manner. SSA decreased the phosphorylation of NF-kappaB (p-NF-κB) (

0.01) and enhanced the phosphorylation of signal transducer and activator of transcription 6 (p-STAT6) in M2 macrophages (

0.05).

Conclusion

SSA may affect the differentiation and function of M1/M2 macrophages by regulating NF-κB and STAT6 signaling pathways.

关键词

Keywords

references

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