抗HER2抗体偶联药物联合抗PD-1单抗对小鼠膀胱肿瘤的作用及机制研究

何硕; 陶璐; 武越; 史梦婷; 张甜甜; 郭园园; 汪蕊

doi:10.16016/j.2097-0927.202504097

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抗HER2抗体偶联药物联合抗PD-1单抗对小鼠膀胱肿瘤的作用及机制研究

基础医学 | 更新时间：2025-07-25

- 抗HER2抗体偶联药物联合抗PD-1单抗对小鼠膀胱肿瘤的作用及机制研究
- Effect and mechanism of HER2 antibody-drug conjugate combined with anti-PD-1 antibody in mouse bladder cancer models
- 陆军军医大学学报 2025年47卷第14期页码：1623-1631
- 作者机构：
  
  1.蚌埠医科大学第一附属医院：，肿瘤内科，安徽蚌埠
  2.蚌埠医科大学第一附属医院：，泌尿外科，安徽蚌埠
  3.蚌埠医科大学第一附属医院：，安徽省肿瘤演进及智能诊疗重点实验室，安徽蚌埠
- 作者简介：
  
  汪蕊，E-mail：ruiwang1011@163.com
- 基金信息：
  
  安徽省卫生健康科研重点项目(AHWJ2023A10096)
- DOI：10.16016/j.2097-0927.202504097
  中图分类号： R737.14;R969.4;R979.19
- 收稿日期：2025-04-26，
  
  修回日期：2025-06-18，
  
  纸质出版日期：2025-07-30
- 稿件说明：
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何硕，陶璐，武越，等.抗HER2抗体偶联药物联合抗PD-1单抗对小鼠膀胱肿瘤的作用及机制研究［J］.陆军军医大学学报，2025，47（14）：1623-1631.DOI：10.16016/j.2097-0927.202504097.

HE S，TAO L，WU Y，et al.Effect and mechanism of HER2 antibody-drug conjugate combined with anti-PD-1 antibody in mouse bladder cancer models［J］.J Army Med Univ，2025，47（14）：1623-1631.DOI：10.16016/j.2097-0927.202504097.
何硕，陶璐，武越，等.抗HER2抗体偶联药物联合抗PD-1单抗对小鼠膀胱肿瘤的作用及机制研究［J］.陆军军医大学学报，2025，47（14）：1623-1631.DOI：10.16016/j.2097-0927.202504097. DOI：

HE S，TAO L，WU Y，et al.Effect and mechanism of HER2 antibody-drug conjugate combined with anti-PD-1 antibody in mouse bladder cancer models［J］.J Army Med Univ，2025，47（14）：1623-1631.DOI：10.16016/j.2097-0927.202504097. DOI：

摘要

目的

探究抗HER2抗体偶联药物（HER2 antibody-drug conjugate，HER2-ADC）联合抗PD-1单抗（anti-PD-1 antibody，anti-PD-1）对HER2表达膀胱癌的协同治疗效果，并阐明其对肿瘤免疫微环境的调控机制。

方法

选取40只6~8周龄（体质量18~22 g）的C57BL/6雌性小鼠构建过表达人HER2的MB49膀胱癌细胞C57BL/6小鼠异位肿瘤模型。当肿瘤体积达100 mm³时，采用随机数字表法分为4组（

=10）：对照组（腹腔注射PBS 1.0 mL），anti-PD-1组（腹腔注射anti-PD-1，每只小鼠200 μg/次，间隔3 d给药），HER2-ADC组（腹腔注射HER2-ADC，2.5 mg/kg，1次/7 d）和联合组（HER2-ADC和anti-PD-1给药方案同单药组）。连续给药28 d，期间每3天测量肿瘤体积与体质量，比较各组异位肿瘤生长速度与荷瘤小鼠生存率。停药后持续观察小鼠生存状态至自然死亡，记录中位生存时间（

=5）。药物干预28 d后留取各组部分荷瘤鼠外周血及肿瘤样本（

=5），流式细胞术检测外周血MDSCs细胞（CD11b

、Gr1

）和Treg细胞（CD4

、CD25

、FOXP3

），免疫组化分析肿瘤内CD3

T、CD8

T、FOXP3

T细胞浸润，全自动生化仪评估肝肾功能：谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、血尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）及组织损伤指标：乳酸脱氢酶（LDH-L）的水平。

结果

治疗28 d时，联合组肿瘤体积显著低于对照组（

0.01）及单药组（

0.01）。单药组（anti-PD-1组中位生存期53 d；HER2-ADC组55 d）及联合组（65 d）均较对照组（41 d）显著延长（

0.01）。药物干预28 d后，单药组和联合组小鼠外周血中MDSCs细胞和Treg细胞比率低于对照组，联合组较单药组降低（

0.05）。肿瘤微环境中，联合组CD3

T和CD8

T细胞浸润水平较对照组和单药组明显增加（

0.05），FOXP3

T细胞浸润水平较对照组和单药组显著减少（

0.05）。各组血清ALT、AST、BUN、CRE、LDH-L水平差异无统计学意义，且均在正常参考范围内。

结论

HER2-ADC联合anti-PD-1可抑制异位膀胱肿瘤生长，可能通过下调MDSCs/Treg并促进CD8

T细胞浸润发挥协同作用。

Abstract

Objective‍　‍To investigate the synergistic therapeutic effects of HER2 antibody-drug conjugate (HER2-ADC) combined with anti-PD-1 antibody (anti-PD-1) on HER2-expressing bladder cancer and elucidate its regulatory mechanisms on the tumor immune microenvironment. Methods‍　‍Orthotopic tumor models were established in 40 female C57BL/6 mice (6~

8 weeks old

body mass 18~22 g) using MB49 bladder cancer cells overexpressing human HER2. When tumors reached 100 mm³

the mice were randomized into (

=10) control (intraperitoneal injection of 1.0 mL PBS)

anti-PD-1 (200 µg per mouse every 3 d)

HER2-ADC (2.5 mg/kg once weekly)

and combination groups (same regimens as above monotherapy). Tumor volume and body mass were measured every 3 d during 28-day treatment. Tumor growth kinetics and survival rates were analyzed. Post-treatment survival was monitored until natural death to determine median survival time (

=5). At day 28

blood and tumor samples (

=5) were collected to detect myeloid-derived suppressor cells (MDSCs; CD11b⁺Gr1⁺) and regulatory T cells (Tregs; CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺) with flow cytometry

tumor-infiltrating CD3⁺T

CD8⁺T

and FOXP3⁺T cells with immunohistochemical assasy

and liver/kidney functions [alanine aminotransferase (ALT)

aspartate aminotransferase (AST)

blood urea nitrogen (BUN)

creatinine (CRE)

]

and tissue damage indicators [lactate dehydrogenase isoenzyme (LDH-L)

]

. Results‍　‍In 28 d after treatment

the combination group obtained significantly smallest tumor volume than the control group and the 2 monotherapy groups (all

0.01). The longest median survival was observed in the combination group (65 d

0.01)

followed by the HER2-ADC group (55 d)

anti-PD-1 group (53 d) and control group (41 d). After 28 d of treatment

the combination group exhibited obviously the smallest peripheral proportions of MDSCs/Tregs

most tumor-infiltrating CD3⁺T/CD8⁺T cells

and less FOXP3⁺T cells when compared with the 2 monotherapy groups and control group (all

0.05). While

the 2 monotherapy groups had smaller MDSCs/Tregs proportions than the control group (

0.05). No significant differences were observed among the 4 groups in serum ALT

AST

BUN

CRE

or LDH-L levels

and all of them were within normal ranges. Conclusion‍

　‍HER2-ADC combined with anti-PD-1 suppresses the growth of orthotopic bladder tumor

probably through their synergic effects on down-regulating MDSCs/Treg and enhancing CD8⁺T cell infiltration.

关键词

Keywords

references

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