目的　构建可表达人血管生成抑制素 (canstatin)蛋白的真核表达载体

探索canstatin对人脐静脉内皮细胞系(HUVEC)和人肺腺癌A5 49细胞株的生物学效应。方法　RT PCR法从胎儿肝组织中获取canstatincDNA全长

并将其克隆到真核蛋白表达载体pCMV Script上。阳离子脂质体介导该重组载体转染HUVE细胞系、A5 49细胞株。RT PCR法检测其对canstatinmRNA的表达。台盼蓝拒染法活细胞记数

3 H TdR掺入法检测细胞增殖

TUNEL法检测细胞凋亡

流式细胞术检测细胞周期。结果　成功构建pCMV Script Cans真核表达重组载体

并在转染该表达载体的A5 49及HUV EC C细胞株中均检测到canstatinmRNA的表达。HUV EC C细胞株pCMV Script Cans载体转染组比空载体组 3 H TdR掺入量明显减低(P 0 0 1)

细胞凋亡率明显增加 (P 0 0 1)

A5 49细胞株转染组与空载体组 3 H TdR掺入量无显著差异 (P 0 0 5 )

细胞凋亡率无显著差别 (P 0 0 5 )。结论　pCMV Script Cans重组载体能在转染的哺乳动物细胞中表达canstatin

并抑制内皮细胞增殖

诱导内皮细胞凋亡

但对肿瘤细胞没有直接抑制作用。