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网络首发:2004-08-15,
纸质出版:2004
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毛琼国,白云,张波,黄钢,王燕,代佳平,人T细胞基因组随机MARs的分离、克隆及序列分析[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(15):0-.
毛琼国, 白云, 张波, et al. 人T细胞基因组随机MARs的分离、克隆及序列分析[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(15).
毛琼国,白云,张波,黄钢,王燕,代佳平,人T细胞基因组随机MARs的分离、克隆及序列分析[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(15):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2004.15.007
毛琼国, 白云, 张波, et al. 人T细胞基因组随机MARs的分离、克隆及序列分析[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(15). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2004.15.007.
目的 分离、克隆人基因组随机MARs片段
分析其序列特征
为进一步研究MARs在真核细胞DNA复制及基因表达调控中的作用与机制奠定基础。方法 用DNaseⅠ、高盐和蛋白酶K处理细胞核
分离人T细胞基因组随机MARs片段
并将其克隆进入PUC19质粒 ;用体外结合实验筛选能与核基质蛋白结合的克隆并测序
生物信息学分析其序列的特征。结果 从人T细胞基因组中分离得到大量的MARs片段
构建成MARs库
初步任意挑选 5 8个克隆
体外结合实验证实其具有与核基质蛋白结合活性
对其中 1个克隆的序列分析表明
其序列AT含量较高
不仅含有AC 和ATAT基序
还包含有多个转录 复制起点、增强子序列、弯曲DNA和扭结DNA基序以及多个反向重复序列。结论 分离获得的DNA片段具有MAR的特性
同一DNA序列中存在不同的元件组合
其参与基因表达调控的功能应该是复杂、多样的
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