NF-κB p50和p65蛋白保守结构域原核表达系统的建立

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NF-κB p50和p65蛋白保守结构域原核表达系统的建立

更新时间：2026-01-09

- NF-κB p50和p65蛋白保守结构域原核表达系统的建立
- NF-κB p50和p65蛋白保守结构域原核表达系统的建立
- 陆军军医大学学报 2004年26卷第10期
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.10.013
  中图分类号： R346
- 网络首发：2004-05-30，
  
  纸质出版：2004
- 稿件说明：
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李生茂,梁华平,徐祥,刘东辟子,沈利群,蒋琴,胡承香,NF-κB p50和p65蛋白保守结构域原核表达系统的建立[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(10):0-.

李生茂, 梁华平, 徐祥, et al. NF-κB p50和p65蛋白保守结构域原核表达系统的建立[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(10).
李生茂,梁华平,徐祥,刘东辟子,沈利群,蒋琴,胡承香,NF-κB p50和p65蛋白保守结构域原核表达系统的建立[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(10):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.10.013

李生茂, 梁华平, 徐祥, et al. NF-κB p50和p65蛋白保守结构域原核表达系统的建立[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(10). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2004.10.013.

摘要

目的　为了获得具有DNA结合活性的人NF κBp5 0和p65蛋白

建立人NF κBp5 0和p65蛋白保守结构域的原核表达系统。方法　通过PCR法扩增获得人NF κBp5 0和p65蛋白保守结构域的cDNA

后分别将其克隆到原核表达载体pET 2 2b( +)上

转化E .coliBL 2 1

经诱导表达及包涵体的变性和复性处理

获得可溶性p5 0和p65

同时用Western Blot鉴定NF κBp5 0和p65蛋白的表达

EMSA实验检测NF κBp5 0和p65蛋白的DNA结合活性。结果　构建了pET 2 2b/p5 0和pET 2 2b/p65原核表达质粒 ;p5 0、p65蛋白在大肠杆菌中的表达均为包涵体 ;变性、复性后得到了可溶性p5 0和p65蛋白

浓度达 2 18μg/ml和 15 8μg/ml;并证实可溶性p5 0和p65蛋白均具有DNA结合活性。结论　成功建立了pET 2 2b/p5 0和pET 2 2b/p65原核表达系统

获得了具有DNA结合活性的NF κBp5 0和p65蛋白

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