NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选

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更新时间：2026-01-09

- NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选
- NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选
- 陆军军医大学学报 2004年26卷第9期
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.09.006
  中图分类号： R346
- 网络首发：2004-05-15，
  
  纸质出版：2004
- 稿件说明：
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钟小林,秦茂林,NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(09):0-.

钟小林, 秦茂林. NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(9).
钟小林,秦茂林,NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(09):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.09.006

钟小林, 秦茂林. NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(9). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2004.09.006.

目的　从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因

在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU3 5细胞株。方法　RT PCR扩增目的基因

克隆入穿梭载体pExchange 1neo

酶切及测序鉴定。重组载体转染MESPU3 5胚胎干细胞株

G418长期筛选

RT PCR检测转染细胞NT3水平。结果　RT PCR得到长度为 777bp的基因片段

克隆后酶切鉴定正确

测序结果经BLAST对比

与GenBank中小鼠NT 3序列完全一致。成功构建了NT3真核表达载体及高表达细胞株。结论　从小鼠肝脏组织中PCR克隆了正确的NT3基因

所获得的NT3稳定表达MESPU3 5 NT3细胞株为后续相关实验提供了保证

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