目的　观察内毒素刺激下肝Kupffer细胞 (KCs)膜上脂多糖 (LPS)受体CD14的表达及其在细胞因子分泌中的作用。方法　从Wistar大鼠肝组织中分离出KCs

培养 12h并调整细胞浓度为 1× 10 6/ml/孔

将细胞分为 2组。①LPS组 :每孔加入不同浓度LPS(0、10 0ng/ml

1、10 0 μg/ml) ;②PI PLC组 :每孔先加入 1U磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI PLC)后再加入不同浓度LPS。用兔抗鼠CD14抗体和异硫氢酸荧光素 (FITC)标记的羊抗兔IgG对KCs进行免疫染色

流式细胞仪 (FCM)测定FITC阳性KCs数及其荧光强度(FI)

并用酶联免疫法或放免法测定培养液中TNFα和IL 6的含量变化。结果　随着LPS浓度增加

LPS组FITC阳性细胞数显著增多

其FI逐渐增强

培养液中TNFα和IL 6的含量也逐渐增高 (P 0 .0 1) ;PI PLC组FITC阳性细胞数及FI较LPS组明显减少和减弱

培养液中TNFα和IL 6的含量在低浓度LPS刺激时差异无显著性 (P 0 .0 5 )

在高浓度LPS时刺激时才明显增加 (P 0 .0 5 )。结论　LPS能上调KCsCD14表达

同时伴有多种细胞因子分泌 ;PI PLC对内毒素介导KCs分泌细胞因子有一定抑制作用