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网络首发:2001-03-30,
纸质出版:2001
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于乐成,顾长海,毛青,李奇芬,王宇明,郭焕珍,剪切HCV RNA的HDV核酶的设计及活性测定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2001,23(03):0-.
于乐成, 顾长海, 毛青, et al. 剪切HCV RNA的HDV核酶的设计及活性测定[J]. Journal of Army Medical University, 2001, 23(3).
于乐成,顾长海,毛青,李奇芬,王宇明,郭焕珍,剪切HCV RNA的HDV核酶的设计及活性测定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2001,23(03):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2001.03.028
于乐成, 顾长海, 毛青, et al. 剪切HCV RNA的HDV核酶的设计及活性测定[J]. Journal of Army Medical University, 2001, 23(3). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2001.03.028.
目的 探讨丁型肝炎病毒 (HepatitisDvirus
HDV)核酶用于抗丙型肝炎病毒 (HepatitisCvirus
HCV)基因治疗的可能性。方法 以HDV基因组核酶的假结样结构为基础
优化其茎Ⅳ区
改建其底物结合区
获得 3种针对HCVRNA的HDV核酶RzC1、RzC2 和RzC3 。体外转录获取含HCVRNA 5’ 非编码区 ( 5’ noncodingregion
5’ NCR)及部分C区在内的底物RNA(HCVRNA 5’ NCR C)
并进行 5’端放射性标记。在pH 7.5、37℃、Mg2 + 2 0mmol/L和去离子甲酰胺 2 .5mol/L等条件下
将核酶和底物按摩尔比 1 0 0∶1混合
在不同的时间点观察剪切百分率。结果 RzC1、RzC2 对底物的剪切百分率随时间延长而递增
90min时分别达 2 4.9%、2 0 .3% ;未观察到RzC3 有剪切活性。结论 经过结构优化的HDV基因组核酶在合适的位点能够剪切异源性RNA分子HCVRNA
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