锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割

何斌; 杨唐俊; 金欢胜; 王祥卫; 刘素英; 曾毅; 金锡御; 宋波

doi:10.16016/j.1000-5404.1999.07.001

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锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割

更新时间：2026-01-09

- 锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割
- 锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割
- 陆军军医大学学报 1999年21卷第7期
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- DOI：10.16016/j.1000-5404.1999.07.001
  中图分类号： R342.2;R737.14
- 网络首发：1999-07-30，
  
  纸质出版：1999
- 稿件说明：
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何斌,杨唐俊,金欢胜,王祥卫,刘素英,曾毅,金锡御,宋波,锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),1999,21(07):0-.

何斌, 杨唐俊, 金欢胜, et al. 锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割[J]. Journal of Army Medical University, 1999, 21(7).
何斌,杨唐俊,金欢胜,王祥卫,刘素英,曾毅,金锡御,宋波,锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),1999,21(07):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.1999.07.001

何斌, 杨唐俊, 金欢胜, et al. 锤头状核酶对不同长度mdrl mRNA的体外切割[J]. Journal of Army Medical University, 1999, 21(7). DOI： 10.16016/j.1000-5404.1999.07.001.

摘要

目的：探讨膀胱癌多药耐药性逆转的新方法。方法：应用计算机对mdrlmRNA二级结构进行模拟，设计针对mdrlmRNA1959位GUC的“锤头状”（Hammerhead）核酶（Ribozyme1，RZ1）基因，定点克隆于质粒pGEMEX-1的BamHⅠ和EcoRⅠ位点上；将mdrlcDNA864bp的片段亚克隆于pGEMEX-1的HindⅢ和EcoRⅠ位点上，mdrlcDNA1383bp片段亚克隆于pGEMEX-1的EcoRⅠ位点上，在T3启动子作用下体外转录成RZ1、864nt和1430nt的mdrlmRNA。结果：RZ1在体外分别将864nt和I430nt的mdrlmRNA切割成两个片段，切割温度在42℃和52℃两个条件下切割效率差异不明显。结论：核酶对底物的体外切割活性取决于核酶切割位点的选择，与底物长度无关。

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