浏览全部资源
扫码关注微信
瘤内
Gemella haemolysans 对增强食管鳞状细胞癌荷瘤小鼠新辅助化学免疫治疗疗效的研究Intratumoral
Gemella haemolysans promotes neoadjuvant chemoimmunotherapy efficacy in esophageal squamous cell carcinoma-bearing mice- 重庆医科大学学报 2025年50卷第10期 页码：1345-1352
- 作者机构：
1.重庆医科大学附属第一医院胸心外科，重庆 400016
2.重庆医科大学药学院遗传药理学与药物基因组学实验室，重庆 400016
- 作者简介：
宋清华，Email：sqh89757@163.com，研究方向：食管癌瘤内微生物。
吴兰香，Email：lxwu@cqmu.edu.cn。
- 基金信息：国家自然科学基金资助项目(82274023);国家自然科学基金青年基金资助项目(82404754)
DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003919
中图分类号： R655.4收稿：2025-04-11，
修回：2025-05-17，
录用：2025-06-21，
纸质出版：2025-10-28
- 稿件说明：
移动端阅览
宋清华,卢睿瑾,黄羽棠,等.瘤内Gemella haemolysans对增强食管鳞状细胞癌荷瘤小鼠新辅助化学免疫治疗疗效的研究[J].重庆医科大学学报,2025,50(10):1345-1352.
Song Qinghua,Lu Ruijin,Huang Yutang,et al.Intratumoral Gemella haemolysans promotes neoadjuvant chemoimmunotherapy efficacy in esophageal squamous cell carcinoma-bearing mice[J].Journal of Chongqing Medical University,2025,50(10):1345-1352.
宋清华,卢睿瑾,黄羽棠,等.瘤内Gemella haemolysans对增强食管鳞状细胞癌荷瘤小鼠新辅助化学免疫治疗疗效的研究[J].重庆医科大学学报,2025,50(10):1345-1352. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003919.
Song Qinghua,Lu Ruijin,Huang Yutang,et al.Intratumoral Gemella haemolysans promotes neoadjuvant chemoimmunotherapy efficacy in esophageal squamous cell carcinoma-bearing mice[J].Journal of Chongqing Medical University,2025,50(10):1345-1352. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003919.
摘要
目的
2
探讨瘤内溶血孪生球菌（
Gemella haemolysans
，
G.haemolysans
）能否增强食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）荷瘤小鼠新辅助化学免疫治疗（Neoadjuvant chemoimmunotherapy，NACI）疗效及可能的作用机制。
方法
2
随机将25只4周龄的C57BL/6雌鼠分为5组，每组5只，分别为
阴性对照组（NC组）、化疗组、
G.haemolysans
-化疗组、免疫治疗组、
G.haemolysans
-免疫治疗组。每组小鼠予以复合抗生素（Antibiotic Cocktail，ATBx）统一处理2周，构建无菌小鼠模型。第0天，通过皮下接种小鼠食管癌细胞株AKR及
G.haemolysans
-AKR细胞，构建ESCC荷瘤小鼠模型。第7天小鼠皮下成瘤后，每周3次腹腔注射药物，第28天治疗结束后，对小鼠实施安乐死，离体肿瘤组织经4%多聚甲醛固定后进行荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization，FISH），定量分析肿瘤组织内
G.haemolysans
的定位与表达差异；同时进行多重荧光免疫组化技术（multiplex immunohistochemical，mIHC）及流式细胞术（flow cytometer，FCM）系统性分析免疫治疗组小鼠肿瘤免疫微环境（tumor immune mircroenvironment，TIME）中免疫细胞的数量。
结果
2
G.haemolysans
可以明显促进NACI治疗ESCC的效果（
P
<
0.05），
G.haemolysans
对荷瘤小鼠的化疗方案没有作用，但对NACI治疗方案有明显的增强作用（
P
<
0.05），且明显促进了TIME中自然杀伤细胞（natural killer，NK）的浸润（
P
<
0.01）。
结论
2
G.haemolysans
通过增加TIME中NK细胞的浸润来提高NACI治疗ESCC荷瘤小鼠的效果。
Abstract
Objective
2
To investigate whether intratumoral
Gemella haemolysans
（
G.haemolysans
） enhances the efficacy of neoadjuvant chemoimmunotherapy（NACI） in esophageal squamous cell carcinoma（ESCC）-bearing mice and the underlying mechanism.
Methods
2
Twenty-five 4-week-old female
C57BL/6
mice were randomized into five groups（
n
=5 per group）：negative control（NC） group，chemotherapy group，
G.haemolysans
+ chemotherapy group，NACI group，and
G.haemolysans
+ NACI group. A germ-free mouse model was established in each group by administering antibiotic cocktail for 2 weeks. On day 0，ESCC-bearing mouse models were built through subcutaneous inoculation of either murine esophageal cancer cell line AKR or
G.haemolysans
-AKR cells. On day 7 when tumors formed under the skin，drugs were injected into the abdomen thrice weekly. On day 28 when the treatments were finished，the mice were sacrificed to harvest their tumors，and th
en the tumors were fixed in 4% paraformaldehyde. We located and quantified
G.haemolysans
within the tumors through fluorescence in situ hybridization，and characterized immune cell composition in the tumor immune microenvironment（TIME） of the mice treated with NACI through multiplex immunohistochemistry and flow cytometry.
Results
2
G.haemolysans
significantly strengthened the efficacy of NACI in ESCC（
P
<
0.05），whereas no chemosensitizing effects were observed on chemotherapy in ESCC-bearing mice.
G.haemolysans
significantly enhanced natural killer（NK） cell infiltration within the TIME（
P
<
0.01）.
Conclusion
2
G.haemolysans
improves NACI efficacy in ESCC-bearing mice by increasing NK cell recruitment in the TIME.
关键词
Keywords
references
Sung H ， Ferlay J ， Siegel RL ， et al . Global cancer statistics 2020：GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries [J ] . CA Cancer J Clin ， 2021 ， 71 （ 3 ）： 209 - 249 .
Zhu J ， Du LB ， Li HZ ， et al . Clinicopathological and therapeutic comparisons of esophageal cancer between China and the USA：a multicenter hospital-based study [J ] . J Natl Cancer Cent ， 2024 ， 4 （ 4 ）： 318 - 325 .
Obermannová R ， Alsina M ， Cervantes A ， et al . Oesophageal cancer：ESMO Clinical Practice Guideline for diagnosis，treatment and follow-up [J ] . Ann Oncol ， 2022 ， 33 （ 10 ）： 992 - 1004 .
Obermannová RL ， Leong T ， ESMO Guidelines Committee Electronic address ： clinicalguidelines@esmoorg . ESMO Clinical Practice Guideline interim update on the treatment of locally advanced oesophageal and oesophagogastric junction adenocarcinoma and metastatic squamous-cell carcinoma [J ] . ESMO Open ， 2025 ， 10 （ 2 ）： 104134 .
Huang BJ ， Shi HY ， Gong XH ， et al . Comparison of efficacy and safety between pembrolizumab combined with chemotherapy and simple chemotherapy in neoadjuvant therapy for esophageal squamous cell carcinoma [J ] . J Gastrointest Oncol ， 2021 ， 12 （ 5 ）： 2013 - 2021 .
Jing SW ， Zhai C ， Zhang W ， et al . Comparison of neoadjuvant immunotherapy plus chemotherapy versus chemotherapy alone for patients with locally advanced esophageal squamous cell carcinoma：a propensity score matching [J ] . Front Immunol ， 2022 ， 13 ： 970534 .
Zheng Y ， Liang GH ， Yuan DF ， et al . Perioperative toripalimab plus neoadjuvant chemotherapy might improve outcomes in resectable esophageal cancer：an interim analysis of a phase III randomized clinical trial [J ] . Cancer Commun （Lond） ， 2024 ， 44 （ 10 ）： 1214 - 1227 .
Wang PY ， Chen YJ ， Lei MX ， et al . Comparison of neoadjuvant chemoimmunotherapy and neoadjuvant chemotherapy for resectable esophageal squamous cell carcinoma：a retrospective study with 3-year survival analysis [J ] . J Cancer Res Clin Oncol ， 2024 ， 150 （ 10 ）： 477 .
Wang J ， Li B ， Zhang YW ， et al . Tislelizumab combined with nab-paclitaxel and cisplatin as the more effective chemoimmunotherapy strategy in the neoadjuvant treatment of locally advanced thoracic esophageal squamous cell carcinoma：a prospective，two-cohort，phase 2 trial [J ] . Int J Cancer ， 2025 ， 156 （ 7 ）： 1429 - 1438 .
Yang H ， Liu H ， Chen YP ， et al . Long-term efficacy of neoadjuvant chemoradiotherapy plus surgery for the treatment of locally advanced esophageal squamous cell carcinoma：the NEOCRTEC5010 randomized clinical trial [J ] . JAMA Surg ， 2021 ， 156 （ 8 ）： 721 - 729 .
Yang GZ ， Su XD ， Huang YH ， et al . Intensive cycles of neoadjuvant camrelizumab combined with chemotherapy in locally advanced esophageal squamous cell carcinoma：a single-arm，phase II trial [J ] . J Transl Med ， 2023 ， 21 （ 1 ）： 411 .
Xu JX ， Yan C ， Li Z ， et al . Efficacy and safety of neoadjuvant chemoimmunotherapy in resectable esophageal squamous cell carcinoma：a meta-analysis [J ] . Ann Surg Oncol ， 2023 ， 30 （ 3 ）： 1597 - 1613 .
Chen WQ ， Zheng RS ， Baade PD ， et al . Cancer statistics in China，2015 [J ] . CA A Cancer J Clinicians ， 2016 ， 66 （ 2 ）： 115 - 132 .
Wang XL ， Fang Y ， Liang W ， et al . Fusobacterium nucleatum facilitates anti-PD-1 therapy in microsatellite stable colorectal cancer [J ] . Cancer Cell ， 2024 ， 42 （ 10 ）： 1729 - 1746 .
Dewhirst FE ， Chen T ， Izard J ， et al . The human oral microbiome [J ] . J Bacteriol ， 2010 ， 192 （ 19 ）： 5002 - 5017 .
Heller D ， Helmerhorst EJ ， Gower AC ， et al . Microbial diversity in the early in vivo-formed dental biofilm [J ] . Appl Environ Microbiol ， 2016 ， 82 （ 6 ）： 1881 - 1888 .
Kaufhold A ， Lütticken R ， Franzen D . Endocarditis caused by Gemella haemolysans [J ] . Infection ， 1989 ， 17 （ 6 ）： 385 - 387 .
Scola BL ， Raoult D . Molecular identification of Gemella species from three patients with endocarditis [J ] . J Clin Microbiol ， 1998 ， 36 （ 4 ）： 866 - 871 .
Liu Y ， Li ZR ， Qi YX ， et al . Metagenomic analysis reveals a changing microbiome associated with the depth of invasion of oral squamous cell carcinoma [J ] . Front Microbiol ， 2022 ， 13 ： 795777 .
Nardelli C ， Granata I ， Nunziato M ， et al . 16S rRNA of mucosal colon microbiome and CCL2 circulating levels are potential biomarkers in colorectal cancer [J ] . Int J Mol Sci ， 2021 ， 22 （ 19 ）： 10747 .
Li ZQ ， Dou LZ ， Zhang YM ， et al . Characterization of the oral and esophageal microbiota in esophageal precancerous lesions and squamous cell carcinoma [J ] . Front Cell Infect Microbiol ， 2021 ， 11 ： 714162 .
中国临床肿瘤学会指南工作委员会组织 . 中国临床肿瘤学会（CSCO）食管癌诊疗指南-2024 [M ] . 北京 ： 人民卫生出版社 ， 2024 .
The Chinese Society of Clinical Oncology ：Clinical guidelines for the diagnosis and treatment of esophageal cancer [M ] . Beijing ： People’s Medical Publishing House ， 2024 .
Liu J ， Li JP ， Lin WL ， et al . Neoadjuvant camrelizumab plus chemotherapy for resectable，locally advanced esophageal squamous cell carcinoma （NIC-ESCC2019）：a multicenter，phase 2 study [J ] . Int J Cancer ， 2022 ， 151 （ 1 ）： 128 - 137 .
Yu T ， Guo FF ， Yu YN ， et al . Fusobacterium nucleatum promotes chemoresistance to colorectal cancer by modulating autophagy [J ] . Cell ， 2017 ， 170 （ 3 ）： 548 - 563 .
Li YQ ， Xing S ， Chen FF ， et al . Intracellular Fusobacterium nucleatum infection attenuates antitumor immunity in esophageal squamous cell carcinoma [J ] . Nat Commun ， 2023 ， 14 （ 1 ）： 5788 .
Dunn GP ， Old LJ ， Schreiber RD . The three Es of cancer immunoediting [J ] . Annu Rev Immunol ， 2004 ， 22 ： 329 - 360 .
Lin Z ， Rao WQ ， Xiang ZS ， et al . Characteristics and interplay of esophageal microbiota in esophageal squamous cell carcinoma [J ] . BMC Cancer ， 2022 ， 22 （ 1 ）： 696 .
Li J ， Wei H . Establishment of an efficient germ-free animal system to support functional microbiome research [J ] . Sci China Life Sci ， 2019 ， 62 （ 10 ）： 1400 - 1403 .
Fu AK ， Yao BQ ， Dong TT ， et al . Tumor-resident intracellular microbiota promotes metastatic colonization in breast cancer [J ] . Cell ， 2022 ， 185 （ 8 ）： 1356 - 1372 .
Wang YF ， Wang XL ， Li WH ， et al . Huaier enhances the antitumor effects of CDK 4/6 inhibitor by remodeling the immune microenvironment and gut microbiota in breast cancer [J ] . J Ethnopharmacol ， 2025 ， 347 ： 119723 .
林 静 ， 何佳茜 ， 尚翠玲 ， 等 . 5种常见致病菌菌液OD值与其活菌数相关性研究 [J ] . 天津农学院学报 ， 2017 ， 24 （ 4 ）： 42 - 45 .
Lin J ， He JX ， Shang CL ， et al . （2017）. Correlation between OD value and viable bacterial count for five common pathogenic bacteria . [J ] Tianjin Agric.Univ. ， 2017 ， 24 （ 4 ）: 42 - 45 .
Liu N ， Chen LH ， Yan MJ ， et al . Eubacterium rectale improves the efficacy of anti-PD1 immunotherapy in melanoma via l-serine-mediated NK cell activation [J ] . Research（Wash D C） ， 2023 ， 6 ： 0127 .
0
浏览量
5
下载量
0
CSCD
- 网络PDF下载
- WORD下载
- Meta-XML下载
- BibTeX下载
- Endnote下载
- RefMan 下载
- NoteExpress下载
- NoteFirst下载
关联资源
相关文章
相关作者
相关机构
- 技术支持由北京北大方正电子有限公司提供 京ICP备09064830号-19
京公网安备11010802024621 - 本系统建议在Chrome、 IE9+ 以上版本浏览器阅读本站内容，360浏览器请切换至极速模式
- Cookies帮助我们提供服务并提供个性化体验。使用本网站，即表示您同意我们使用Cookies
