芒柄花素保护BV2小胶质细胞糖氧剥夺再灌注损伤及其机制研究

韦丁玲; 王湄; 王文秀; 曹丽平; 何前松

doi:10.13406/j.cnki.cyxb.003701

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芒柄花素保护BV2小胶质细胞糖氧剥夺再灌注损伤及其机制研究

基础研究 | 更新时间：2025-10-23

- 芒柄花素保护BV2小胶质细胞糖氧剥夺再灌注损伤及其机制研究
- Protective effects of formononetin against oxygen-glucose deprivation/ reperfusion injury in BV2 microglia and associated mechanism
- 重庆医科大学学报 2025年50卷第2期页码：244-249
- 作者机构：
  
  1.贵州中医药大学第一临床医学院，贵阳 550001
  2.贵州中医药大学第一附属医院神经内科，贵阳 550001
- 作者简介：
  
  韦丁玲，Email：1058358564@qq.com，研究方向：中医药防治脑血管疾病。
  何前松，Email：hqs0820@126.com。
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金资助项目(82160850);贵州省科技基金资助项目(黔科合基础[2020]1Z071)
- DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003701
  中图分类号： R926
- 收稿：2024-03-25，
  
  修回：2024-04-26，
  
  录用：2024-07-14，
  
  纸质出版：2025-02-28
- 稿件说明：
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韦丁玲,王湄,王文秀,等.芒柄花素保护BV2小胶质细胞糖氧剥夺再灌注损伤及其机制研究[J].重庆医科大学学报,2025,50(2):244-249.

Wei Dingling,Wang Mei,Wang Wenxiu,et al.Protective effects of formononetin against oxygen-glucose deprivation/ reperfusion injury in BV2 microglia and associated mechanism[J].Journal of Chongqing Medical University,2025,50(2):244-249.
韦丁玲,王湄,王文秀,等.芒柄花素保护BV2小胶质细胞糖氧剥夺再灌注损伤及其机制研究[J].重庆医科大学学报,2025,50(2):244-249. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003701.

Wei Dingling,Wang Mei,Wang Wenxiu,et al.Protective effects of formononetin against oxygen-glucose deprivation/ reperfusion injury in BV2 microglia and associated mechanism[J].Journal of Chongqing Medical University,2025,50(2):244-249. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003701.

摘要

目的

探讨芒柄花素（formononetin，FN）对糖氧剥夺再灌注（glucose and oxygen deprivation/reperfusion，OGD/R）刺激的BV2小胶质细胞多聚ADP核糖聚合酶1［poly（ADP-ribose） polymerase 1，PARP1］/聚（ADP-核糖）糖水解酶［poly（ADP-Ribose） glycohydrolase，PARG］信号通路及神经炎症的影响。

方法

建立OGD/R BV2细胞模型，分为空白对照组、OGD/R组、10 μm FN组、OGD/R+10 μm FN处理组、OGD/R+抑制剂PJ34（10 μm）处理组、OGD/R+抑制剂Ethacridine lactate（7.5 μm）处理组。采用免疫荧光法（immunofluorescence method，IF）检测BV2细胞核因子-κB p65（Nuclear factor-kappa B p65，NF-κB p65）蛋白核转移及p53、凋亡诱导因子（apoptosis-inducing factor，AIF）、Toll样受体４（Toll-like receptor 4，TLR4）蛋白表达；免疫印迹法检测（Western blot，WB）PARP1/PARG通路相关蛋白表达；酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清γ干扰素（interferon-γ，IFN-γ）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）以及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量。

结果

WB结果显示，与对照组相比，进行糖氧剥夺6 h后再进行复糖复氧培养1 h，细胞中PARP1、PARG表达明显升高（

0.000）；与OGD/R组相比，在OGD/R后加入FN处理，BV2细胞中PARP1（

0.000）和PARG（

0.000）蛋白表达量明显下降，Iduna蛋白表达量明显上升（

0.000）；在OGD/R后加入PARP抑制剂PJ34处理后，PARP1蛋白表达量明显下降（

0.000），但PARG和Iduna蛋白表达量无明显变化（

0.061）；在OGD/R后加入PARG抑制剂Ethacridine lactate处理后，BV2细胞中PARG蛋白表达量明显下降（

0.000），但PARP1和Iduna蛋白表达量无明显变化（

0.072）。IF结果显示，与OGD/R组相比，OGD/R后加入FN，细胞中p53、AIF、TLR4、NF-κB p65表达均明显下降，且NF-κB p65核转移明显减少；在OGD/R后加入PARP抑制剂PJ34或PARG抑制剂Ethacridine lactate，p53、AIF、TLR4表达同样下降，NF-κB p65核转移也明显减少。ELISA结果显示，与OGD/R组BV2细胞相比，在OGD/R后加入FN处理，细胞中IL-1β（

0.004）和TNF-α（

0.040）表达明显降低，但INF-γ水平无明显变化（

0.056）；在OGD/R后加入PARP抑制剂PJ34处理后，BV2细胞中促炎因子INF-γ（

0.000）、IL-1β（

0.021）和TNF-α（

0.003）表达水平明显降低，或PARG抑制剂Ethacridine lactate处理后，BV2细胞中促炎因子INF-γ、IL-1β和TNF-α表达水平亦明显降低（

0.000）。

结论

FN可抑制糖氧剥夺BV2小胶质细胞中神经炎症，其机制涉及PARP1/PARG信号通路调控。

Abstract

Objective

To investigate the effects of formononetin on the PARP1/PARG signaling pathway and neuroinflammation in BV2 microglia activated by oxygen-glucose deprivation/reperfusion（OGD/R）.

Methods

An OGD/R model was established with BV2 cells. These microglia were divided into blank control group，OGD/R group，formononetin（10 μm） group，OGD/R+formononetin（10 μm） group，OGD/R+PJ34（PARP1 inhibitor，10 μm） group，and OGD/R+ethacridine lactate（PARG inhibitor，7.5 μm） group. We measured the nuclear translocation of nuclear factor-kappa B（NF-κB） p65 and the expression of p53，apoptosis-inducing factor （AIF），and Toll-like receptor 4（TLR4） proteins in BV2 cells by immunofluorescence assay；measured the expression of PARP1/PARG pathway-related proteins by Western blot；and determined the content of interferon（INF）-γ，interleukin（IL）-1β，and tumor necrosis factor-α（TNF-α） by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）.

Results

Western blot results showed that compared with the control group，the expression of PARP1 and PARG in cells was significantly increased after 6-hour oxygen-glucose deprivation followed by 1-hour reperfusion（

0.05）； compared with the OGD/R group，the OGD/R+formononetin group had significantly decreased expression of PARP1 and PARG proteins（

0.05） and significantly increased expression of Iduna protein（

0.05）；the OGD/R+PJ34 group had significantly decreased expression of PARP1 protein（

0.05），but the expression of PARG and Iduna proteins had no significant changes（

0.05）；the OGD/R+ethacridine lactate group had significantly decreased expression of PARG protein（

0.05），but had no significant changes in the expression of PARP1 and Iduna proteins（

0.05）. Immunofluorescence assay results showed that compared with the OGD/R group，formononetin significantly reduced the expression of p53，AIF，TLR4，and NF-κB p65 and the nuclear translocation of NF-κB p65 in OGD/R cells； and both PJ34 and ethacridine lactate significantly reduced the expression of p53，AIF，and TLR4 and the nuclear translocation of NF-κB p65 in OGD/R cells. ELISA results showed that compared with the OGD/R group，formononetin significantly decreased the expression of IL-1β and TNF-α（

0.05），but did not significantly affect INF-γ levels in OGD/R cells （

0.05）； and both PJ34 and ethacridine lactate significantly decreased

the expression levels of the proinflammatory factors INF-γ，IL-1β，and TNF-α in OGD/R cells （

0.05）.

Conclusion

Formononetin can inhibit neuroinflammation in BV2 microglia deprived of glucose and oxygen，through regulating the PARP1/PARG signaling pathway.

关键词

Keywords

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