SF3B1/FOXM1信号通路调控细胞周期干预宫颈癌进展的机制研究

杨美平; 邓颂; 陈明倩; 袁超燕

doi:10.13406/j.cnki.cyxb.003576

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SF3B1/FOXM1信号通路调控细胞周期干预宫颈癌进展的机制研究

基础研究 | 更新时间：2025-10-21

- SF3B1/FOXM1信号通路调控细胞周期干预宫颈癌进展的机制研究
- Mechanism of the splicing factor 3B subunit 1/forkhead box protein M1 signaling pathway regulating cell cycle and intervening against the progression of cervical cancer
- 重庆医科大学学报 2024年49卷第9期页码：1129-1136
- 作者机构：
  
  湖北民族大学附属民大医院妇科，恩施 445000
- 作者简介：
  
  杨美平，Email：overtake899@163.com，研究方向：妇科肿瘤。
  袁超燕，Email：yuanchaoyan@126.com。
- 基金信息：
  
  湖北省卫生健康委员会科研资助项目(WJ2023M117)
- DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003576
  中图分类号： R737.33
- 收稿：2023-09-20，
  
  修回：2023-11-17，
  
  录用：2024-04-15，
  
  纸质出版：2024-09-28
- 稿件说明：
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杨美平,邓颂,陈明倩,等.SF3B1/FOXM1信号通路调控细胞周期干预宫颈癌进展的机制研究[J].重庆医科大学学报,2024,49(9):1129-1136.

Yang Meiping,Deng Song,Chen Mingqian,et al.Mechanism of the splicing factor 3B subunit 1/forkhead box protein M1 signaling pathway regulating cell cycle and intervening against the progression of cervical cancer[J].Journal of Chongqing Medical University,2024,49(9):1129-1136.
杨美平,邓颂,陈明倩,等.SF3B1/FOXM1信号通路调控细胞周期干预宫颈癌进展的机制研究[J].重庆医科大学学报,2024,49(9):1129-1136. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003576.

Yang Meiping,Deng Song,Chen Mingqian,et al.Mechanism of the splicing factor 3B subunit 1/forkhead box protein M1 signaling pathway regulating cell cycle and intervening against the progression of cervical cancer[J].Journal of Chongqing Medical University,2024,49(9):1129-1136. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003576.

摘要

目的

基于剪接因子3B亚单位1（splicing-factor-3B-subunit-1，SF3B1）/叉头框蛋白M1（Forkhead Box M1，FOXM1）轴探讨调控细胞周期宫颈癌进展的作用机制。

方法

通过转染SF3B1过表达质粒（SF3B1 overexpression plasmid，pSF3B1）和2个SF3B1特异性短发夹RNA（short hairpin RNA）（shSF3B1-1、shSF3B1-2）过表达HeLa细胞或敲低SiHa细胞SF3B1。通过试验和乙炔基-2′-脱氧尿苷分析细胞的增殖活力和增殖率。流式细胞术分析细胞周期分布。应用细胞周期聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）阵列分析、流式细胞术、染色质免疫共沉淀-定量聚合酶链式反应（chromatin immunoprecipitation -quantitative polymerase chain reaction，ChIP-qPCR）和荧光素酶实验明确SF3B1和FOXM1的靶向关系。

结果

SF3B1过表达后，HeLa细胞的生长率和增殖能力均显著增加（

0.05）。此外，SF3B1敲低后，SiHa细胞的生长率和增殖能力均显著降低（

0.05）。在HeLa细胞中，与pENTER组相比，pSF3B1组细胞在细胞周期的G

期降低。然而，在SiHa细胞系中，敲低SF3B1提高了G

期比率。此外，SF3B1过表达促进了HeLa细胞中G

期相关蛋白细胞周期蛋白D1表达，而敲低SF3B1抑制了SiHa细胞中周期蛋白D1表达。上调SF3B1表达明显增强FOXM1的表达，而下调SF3B1导致FOXM1的明显抑制。ChIP-qPCR分析进一步显示SF3B1在HeLa细胞系中与FOXM1启动子位点结合。在野生型FOXM1启动子中，与shNC组相比，荧光素酶活性在SF3B1敲低组中受到抑制（1.30±0.08 vs. 0.73±0.02、0.70±0.04，均

0.01），突变型FOXM1启动子不能在SiHa细胞中引发对shSF3B1的应答。HeLa细胞的增殖能力通过SF3B1过表达

而增强（shNC+pENTER vs. shNC+pSF3B1：25.1±1.9 vs. 61.2±3.8，

0.01），并被shFOXM1降低（shNC+pSF3B1 vs. shFOXM1+pSF3B1：61.2±3.8 vs. 18.5±1.9，

0.001），并且SF3B1过表达诱导的细胞G0/G1周期降低通过敲低FOXM1而部分逆转（shNC+pSF3B1 vs. shFOXM1+pSF3B1：35.0±1.5 vs. 58.0±1.8，

0.05）。

结论

SF3B1可以作为宫颈癌中的潜在肿瘤促进基因，其可能通过上调FOXM1的表达来促进宫颈癌细胞增殖并扰乱细胞周期。

Abstract

Objective

To investigate the mechanism of cell cycle regulation in intervening against the progression of cervical cancer based on the splicing factor 3B subunit 1（SF3B1）/forkhead box protein M1（FOXM1） axis.

Methods

SF3B1 overexpression in HeLa cells or SF3B1 knockdown in SiHa cells was achieved by transfection of SF3B1 overexpression plasmid（pSF3B1） and two SF3B1-specific short hairpin RNA（shSF3B1-1 and shSF3B1-2）. CCK-8 test and ethynyl-2′-deoxyuridine（EdU） were used to measure cell proliferation activity and proliferation rate；flow cytometry was used to observe cell cycle distribution；cell cycle PCR array，flow cytometry，chromatin co-immunoprecipitation-quantitative polymerase chain reaction（ChIP-qPCR），and luciferase experiments were used to clarify the targeting relationship between SF3B1 and FOXM1.

Results

After SF3B1 overexpression，there were significant increases in the growth rate and proliferation ability of HeLa cells（

0.05）. In addition，there were significant reductions in the growth rate and proliferation ability of SiHa cells after SF3B1 knockdown（

0.05）. In HeLa cells，compared with the pENTER group，the pSF3B1 group had a significant reduction in the G

ratio，while in SiHa cells，SF3B1 knockdown significantly increased the G

ratio. Furthermore，SF3B1 overexpression significantly promoted the expression of the G

phase-related protein cyclin D1 in HeLa cells，while

SF3B1 knockdown significantly inhibited the expression of cyclin D1 in SiHa cells. Upregulation of SF3B1 significantly enhanced the expression of FOXM1，while downregulation of SF3B1 significantly inhibited FOXM1. ChIP-qPCR analysis showed the binding of SF3B1 to FOXM1 promoter site in HeLa cells. In the wild-type FOXM1 promoter，compared with the shNC group，the SF3B1 knockdown group had inhibition of luciferase activity（1.30±0.08 vs. 0.73±0.02 and 0.70±0.04，

0.01），and the mutant FOXM1 promoter could not trigger a response to shSF3B1 in SiHa cells. The proliferation ability of HeLa cells was enhanced by SF3B1 overexpression（shNC+pENTER vs. shNC+pSF3B1：25.1±1.9 vs. 61.2±3.8，

0.01） and was reduced by shFOXM1（shNC+pSF3B1 vs. shFOXM1+pSF3B1： 61.2±3.8 vs. 18.5±1.9，

0.001），and the reduction in G0/G1 cycle induced by SF3B1 overexpression was partially reversed by FOXM1 knockdown（shNC+pSF3B1 vs. shFOXM1+pSF3B1：35.0±1.5 vs. 58.0±1.8，

0.05）.

Conclusion

SF3B1 can be used as a tumor-promoting gene in cervical cancer，and it can promote the proliferation of cervical cancer cells and disrupt the cell cycle by upregulating the expression of FOXM1.

关键词

Keywords

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