M1表型的小胶质细胞外泌体对血脑屏障功能的影响

蒋雯; 邓琼花; 梅松

doi:10.13406/j.cnki.cyxb.003419

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M1表型的小胶质细胞外泌体对血脑屏障功能的影响

基础研究 | 更新时间：2025-10-22

- M1表型的小胶质细胞外泌体对血脑屏障功能的影响
- Effects of M1 microglia-derived exosomes on the function of the blood-brain barrier
- 重庆医科大学学报 2024年49卷第2期页码：153-157
- 作者机构：
  
  1.昆明医科大学第一附属医院神经内科，昆明 650032
  2.昆明医科大学第一附属医院心脏大血管外科，昆明 650032
- 作者简介：
  
  蒋　雯，Email：arainj@126.com，研究方向：脑血管病。
  梅　松，Email：meisong123@126.com。
- 基金信息：
  
  云南省教育厅科学研究基金资助项目(2022J0199);云南省科技厅-昆明医科大学联合基金资助项目(202201AY070001-049)
- DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003419
  中图分类号： R743.32
- 收稿：2023-05-13，
  
  修回：2023-09-07，
  
  录用：2023-09-14，
  
  纸质出版：2024-02-28
- 稿件说明：
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蒋雯,邓琼花,梅松.M1表型的小胶质细胞外泌体对血脑屏障功能的影响[J].重庆医科大学学报,2024,49(2):153-157.

Jiang Wen,Deng Qionghua,Mei Song.Effects of M1 microglia-derived exosomes on the function of the blood-brain barrier[J].Journal of Chongqing Medical University,2024,49(2):153-157.
蒋雯,邓琼花,梅松.M1表型的小胶质细胞外泌体对血脑屏障功能的影响[J].重庆医科大学学报,2024,49(2):153-157. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003419.

Jiang Wen,Deng Qionghua,Mei Song.Effects of M1 microglia-derived exosomes on the function of the blood-brain barrier[J].Journal of Chongqing Medical University,2024,49(2):153-157. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003419.

摘要

目的

研究M1表型的小胶质细胞外泌体（M1 microglia-derived exosome，M1-exo）对体外血脑屏障（blood-brain barrier，BBB）功能及血管内皮细胞间紧密连接蛋白表达的影响。

方法

用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激小鼠小胶质细胞来源的细胞系BV2细胞，流式技术检测其向M1型极化情况，分离提取外泌体。用小鼠脑微血管内皮细胞系b.End3细胞与原代培养的小鼠星形胶质细胞构建体外BBB模型，随机分为3组：b.End3细胞正常培养组（b.End3组）、b.End3细胞+25 μg/mL正常BV2细胞来源外泌体（BV2-derived exosome，BV2-exo）组（b.End3+BV2-exo组）、b.End3细胞+25 μg/mL M1表型的小胶质细胞来源外泌体组（b.End3+M1-exo组）。按实验分组将不同来源外泌体与BBB模型共培养，检测各组的跨膜电阻（trans-endothelial electrical resistance，TEER）、荧光黄通过率，免疫印迹法（Western blot，WB）检测紧密连接复合物蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1及JAM蛋白的表达。

结果

①小胶质细胞向M1型极化成功，其细胞标志物CD16/32阳性率较对照组明显升高（

=0.023）；②与M1-exo共培养后，体外BBB模型的TEER明显下降（

=0.000），对荧光黄的透过率明显增加（

=0.000）；③与b.End3组和b.End3 + BV2-exo组相比，b.End3+M1-exo组的Claudin-1、Occludin及ZO-1蛋白的表达水平明显下降。

结论

M1-exo可以破坏BBB的完整性，影响其功能。

Abstract

Objective

To investigate the effects of M1 microglia-derived exosomes（M1-exo） on the function of an in-vitro blood-brain barrier（BBB） model and the expression of tight junction proteins between vascular endothelial cells.

Methods

Mouse microglia-derived BV2 cells were stimulated with lipopolysaccharide to be polarized towards the M1 phenotype，and exosomes were isolated and extracted after the phenotype was confirmed by flow cytometry. An in-vitro BBB model was constructed using the mouse brain microvascular endothelial cell line b.End3 and primary cultured mouse astrocytes. The BBB model was co-cultured with exosomes of different sources in three groups：normal culture for b.End3 cells（b.End3 group）；b.End3 cells + 25 μg/mL exosomes derived from normal BV-2 cells（b.End3+BV2-exo group）；and b.End3 cells+25 μg/mL M1-exo（b.End3+M1-exo group）. Trans-endothelial electrical resistance（TEER） and Lucifer yellow permeability were examined. The expression of tight junction complex proteins（claudin-1，occludin，zonula occludens-1［ZO-1］，and junctional adhesion molecules） was measured by Western blot.

Results

Microglia were successfully polarized to the M1 type，and the positivity rate of the M1 marker CD16/32 was significantly increased compared with the control group（

=0.023）. After co-culture with M1-exo，the TEER of the in-vitro BBB model was significantly decreased（

0.001），and Lucifer yellow permeability was significantly increased（

0.001）. Compared with the b.End3 group and b.End3+BV2-exo group，the b.End3+M1-exo group showed significantly decreased expression levels of claudin-1，occludin，and ZO-1.

Conclusion

M1-exo can disrupt the integrity of BBB and interfere with its normal function.

关键词

Keywords

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