不同性激素诱导的SD大鼠妊娠期肝内胆汁淤积症模型的肝脏病理生理研究

张丹; 邵勇; 陈昶; 张华

doi:10.13406/j.cnki.cyxb.003358

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不同性激素诱导的SD大鼠妊娠期肝内胆汁淤积症模型的肝脏病理生理研究

基础研究 | 更新时间：2025-10-22

- 不同性激素诱导的SD大鼠妊娠期肝内胆汁淤积症模型的肝脏病理生理研究
- Liver pathophysiology of Sprague-Dawley rat models of intrahepatic cholestasis of pregnancy induced by different sex hormones
- 重庆医科大学学报 2023年48卷第10期页码：1201-1207
- 作者机构：
  
  重庆医科大学附属第一医院妇产科、重庆医科大学生命科学研究所，重庆　400016
- 作者简介：
  
  张　丹，Email：2020110259@stu.cqmu.edu.cn，研究方向：妊娠期肝内胆汁淤积症，妊娠期糖尿病。
  张　华，Email：zhanghua@hospital.cqmu.edu.cn。
- 基金信息：
- DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003358
  中图分类号： R714
- 收稿：2023-07-01，
  
  修回：2023-08-06，
  
  录用：2023-09-20，
  
  纸质出版：2023-10-28
- 稿件说明：
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张丹,邵勇,陈昶,等.不同性激素诱导的SD大鼠妊娠期肝内胆汁淤积症模型的肝脏病理生理研究[J].重庆医科大学学报,2023,48(10):1201-1207.

Zhang Dan,Shao Yong,Chen Chang,et al.Liver pathophysiology of Sprague-Dawley rat models of intrahepatic cholestasis of pregnancy induced by different sex hormones[J].Journal of Chongqing Medical University,2023,48(10):1201-1207.
张丹,邵勇,陈昶,等.不同性激素诱导的SD大鼠妊娠期肝内胆汁淤积症模型的肝脏病理生理研究[J].重庆医科大学学报,2023,48(10):1201-1207. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003358.

Zhang Dan,Shao Yong,Chen Chang,et al.Liver pathophysiology of Sprague-Dawley rat models of intrahepatic cholestasis of pregnancy induced by different sex hormones[J].Journal of Chongqing Medical University,2023,48(10):1201-1207. DOI： 10.13406/j.cnki.cyxb.003358.

摘要

目的

通过分析雌二醇、孕酮诱导的大鼠妊娠期肝内胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP）模型的肝脏损伤水平、胆汁酸谱以及炎症因子、氧化应激水平，探索妊娠期肝内胆汁淤积的发病机制。

方法

妊娠期Sprague-Dawley（SD）大鼠颈部皮下注射雌二醇或孕酮构建大鼠ICP模型。通过检测血清总胆汁酸（total bile acid，TBA）、丙氨酸氨基转移酶（alanine amiotransferase，ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）水平评价模型是否成功；通过肝脏病理切片评价肝脏损伤情况；采用液相色谱-质谱联用仪分析肝脏胆汁酸谱；使用RT-qPCR检测肝脏中炎症因子肿瘤坏死因子a（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）的转录水平；使用试剂盒检测肝脏氧化和抗氧化标志物丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和谷胱甘肽（glutathione，GSH）的水平；采用RT-qPCR和Western blotting检测肝脏抗氧化应激标志物核因子红系2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，NRF2）、谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰亚基（glutamate-cysteine ligase modifier subunit，GCLM）、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基（glutamate-cysteine ligase catalytic subunit，GCLC）、 NAD（P）H醌氧化还原酶-1［NAD（P）H quinone oxidoreductase-1，NQO1］、血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）的mRNA和蛋白质水平。

结果

雌激素组、孕激素组大鼠血清TBA、ALT、AST、ALP水平均较对照组显著升高。HE染色显示雌激素组大鼠肝血窦变窄，胆汁淤积；孕激素组部分肝细胞水肿，少量脂肪变性细胞出现。胆汁酸谱在各组间有较大差异。雌激素组肝脏中TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平上升，而GSH、SOD和NRF2、GCLM、GCLC、NQO1的mRNA和蛋白质水平下降，而孕激素组均无明显变化。

结论

雌激素、孕激素均能诱导大鼠发生ICP，其中雌激素可抑制NRF2-GCLM、NRF2-GCLC通路并导致肝脏损伤加重，而孕激素则无以上作用。

Abstract

Objective

To explore the pathogenesis of intrahepatic cholestasis of pregnancy（ICP） in rats induced by either estradiol or progesterone，through determining the levels of liver damage，bile acid profiles，inflammatory factors，and oxidative stress.

Methods

ICP models were established by subcutaneous injection of either estradiol or progesterone in the neck of Sprague-Dawley（SD） rats during pregnancy. The models were evaluated by measuring the levels of TBA（serum total bile acid），ALT（alanine aminotransferase），AST（aspartate aminotransferase），and ALP（alkaline phosphatase）. Liver injury was evaluated through pathological section observation. The bile acid profiles of the liver were analyzed by liquid chromatography-mass spectrometry. The transcription levels of inflammatory cytokines（tumor necrosis factor-α[TNF-α]，interleukin[IL]-1β，and IL-6） in the liver were measured using RT-qPCR. The levels of oxidative and antioxidative markers（malondialdehyde[MDA]，glutathione[GSH]，and superoxide dismutase[SOD]） were determined using commercial kits. The mRNA and protein levels of antioxidative stress markers（nuclear factor erythroid 2-related factor 2[NRF2]，glutamate-cysteine ligase modifier subunit[GCLM]，glutamate-cysteine ligase catalytic subunit[GCLC]，NAD（P）H quinone oxidoreductase-1[NQO1]，and heme oxygenase-1[HO-1]） in the liver were determined using RT-qPCR and Western blotting，respectively.

Results

The levels of serum total bile acid，ALT，AST，and ALP in the estradiol group and progesterone group were significantly higher than those in the control group. HE staining showed narrower hepatic sinusoids and cholestasis in the estradiol group and hepatocyte swelling and mild hepatic steatosis in the progesterone group. The bile acid profiles were significantly different between the groups. In the estradiol group，the levels of TNF-α，IL-1β，IL-6，and MDA in the liver were significantly increased，while the levels of GSH and SOD as well as the mRNA and protein levels of NRF2，GCLM，GCLC and NQO1 were significantly decreased，with no significant changes in the progesterone group.

Conclusion

Both estrogen and progesterone induce ICP in rats. Estrogen can inhibit the NRF2-GCLM and NRF2-GCLC pathways to aggravate liver injury，while progesterone has no such effect.

关键词

Keywords

references

Ovadia C ， Sajous J ， Seed PT ， et al . Ursodeoxycholic acid in intrahepatic cholestasis of pregnancy：a systematic review and individual participant data meta-analysis [J ] . Lancet Gastroenterol Hepatol ， 2021 ， 6 （ 7 ）： 547 - 558 .

Assimakopoulos SF ， Thomopoulos KC ， Patsoukis N ， et al . Evidence for intestinal oxidative stress in patients with obstructive jaundice [J ] . Eur J Clin Invest ， 2006 ， 36 （ 3 ）： 181 - 187 .

Palmer KR ， Liu XH ， Mol BW . Management of intrahepatic cholestasis in pregnancy [J ] . Lancet ， 2019 ， 393 （ 10174 ）： 853 - 854 .

Bicocca MJ ， Sperling JD ， Chauhan SP . Intrahepatic cholestasis of pregnancy：review of six national and regional guidelines [J ] . Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol ， 2018 ， 231 ： 180 - 187 .

Germain AM ， Carvajal JA ， Glasinovic JC ， et al . Intrahepatic cholestasis of pregnancy：an intriguing pregnancy-specific disorder [J ] . J Soc Gynecol Investig ， 2002 ， 9 （ 1 ）： 10 - 14 .

Reid R ， Ivey KJ ， Rencoret RH ， et al . Fetal complications of obstetric cholestasis [J ] . Br Med J ， 1976 ， 1 （ 6014 ）： 870 - 872 .

Han F ， Xu LH ， Huang YQ ， et al . Magnesium sulphate can alleviate oxidative stress and reduce inflammatory cytokines in rat placenta of intrahepatic cholestasis of pregnancy model [J ] . Arch Gynecol Obstet ， 2018 ， 298 （ 3 ）： 631 - 638 .

张利平，刘　建 . 雌孕激素诱导妊娠期肝内胆汁淤积症的研究 [J ] . 国际检验医学杂志， 2011 ， 32 （ 3 ）： 320 - 321 .

Zhang LP ， Liu J . Estrogen and progesterone induced intrahepatic cholestasis of pregnancy study [J ] . Int J Lab Med ， 2011 ， 32 （ 3 ）： 320 - 321 .

Shao Y ， Chen SY ， Li H ， et al . Maternal bile acid profile and subtype analysis of intrahepatic cholestasis of pregnancy [J ] . Orphanet J Rare Dis ， 2021 ， 16 （ 1 ）： 259 .

Xiang D ， Yang JY ， Xu YJ ， et al . Estrogen cholestasis induces gut and liver injury in rats involving in activating PI3K/Akt and MAPK signaling pathways [J ] . Life Sci ， 2021 ， 276 ： 119367 .

Biberoglu E ， Kirbas A ， Daglar K ， et al . Role of inflammation in intrahepatic cholestasis of pregnancy [J ] . J Obstet Gynaecol Res ， 2016 ， 42 （ 3 ）： 252 - 257 .

Copple BL ， Jaeschke H ， Klaassen CD . Oxidative stress and the pathogenesis of cholestasis [J ] . Semin Liver Dis ， 2010 ， 30 （ 2 ）： 195 - 204 .

Wu KQ ， Yin BN ， Li S ， et al . Prevalence，risk factors and adverse perinatal outcomes for Chinese women with intrahepatic cholestasis of pregnancy：a large cross-sectional retrospective study [J ] . Ann Med ， 2022 ， 54 （ 1 ）： 2966 - 2974 .

Li Y ， Zhang D ， Mo Y ， et al . Simultaneous determination of sex hormones and bile acids in rat plasma using a liquid chromatography-tandem mass spectrometry method [J ] . J Pharm Biomed Anal ， 2023 ， 223 ： 115139 .

Manzotti C ， Casazza G ， Stimac T ， et al . Total serum bile acids or serum bile acid profile，or both，for the diagnosis of intrahepatic cholestasis of pregnancy [J ] . Cochrane Database Syst Rev ， 2019 ， 7 （ 7 ）： CD012546 .

Li MK ， Crawford JM . The pathology of cholestasis [J ] . Semin Liver Dis ， 2004 ， 24 （ 1 ）： 21 - 42 .

Chen ML ， Takeda K ， Sundrud MS . Emerging roles of bile acids in mucosal immunity and inflammation [J ] . Mucosal Immunol ， 2019 ， 12 （ 4 ）： 851 - 861 .

Woolbright BL ， Jaeschke H . Novel insight into mechanisms of cholestatic liver injury [J ] . World J Gastroenterol ， 2012 ， 18 （ 36 ）： 4985 - 4993 .

Zhang Y ， Hu LQ ， Cui Y ， et al . Roles of PPARγ/NF-κB signaling pathway in the pathogenesis of intrahepatic cholestasis of pregnancy [J ] . PLoS One ， 2014 ， 9 （ 1 ）： e87343 .

Fedotcheva TA ， Fedotcheva NI ， Shimanovsky NL . Progesterone as an anti-inflammatory drug and immunomodulator：new aspects in hormonal regulation of the inflammation [J ] . Biomolecules ， 2022 ， 12 （ 9 ）： 1299 .

Hu YY ， Liu JC ， Xing AY . Oxidative stress markers in intrahepatic cholestasis of pregnancy：a prospective controlled study [J ] . Eur Rev Med Pharmacol Sci ， 2015 ， 19 （ 17 ）： 3181 - 3186 .

Nouri A ， Hashemzadeh F ， Soltani A ， et al . Progesterone exerts antidepressant-like effect in a mouse model of maternal separation stress through mitigation of neuroinflammatory response and oxidative stress [J ] . Pharm Biol ， 2020 ， 58 （ 1 ）： 64 - 71 .

Alese MO ， Bamisi OD ， Alese OO . Progesterone modulates cadmium-induced oxidative stress and inflammation in hepatic tissues of Wistar rats [J ] . Int J Clin Exp Pathol ， 2021 ， 14 （ 10 ）： 1048 - 1055 .

Khambu B ， Li TG ， Yan SM ， et al . Hepatic autophagy deficiency compromises farnesoid X receptor functionality and causes cholestatic injury [J ] . Hepatology ， 2019 ， 69 （ 5 ）： 2196 - 2213 .

Yan Y ， Wang K ， Tang X ， et al . Phytochemicals protect L02 cells against hepatotoxicity induced by emodin via the Nrf2 signaling pathway [J ] . Toxicol Res ， 2019 ， 8 （ 6 ）： 1028 - 1034 .

He LF ， Guo CC ， Peng C ， et al . Advances of natural activators for Nrf2 signaling pathway on cholestatic liver injury protection：a review [J ] . Eur J Pharmacol ， 2021 ， 910 ： 174447 .

Tan KP ， Wood GA ， Yang M ， et al . Participation of nuclear factor（erythroid 2-related），factor 2 in ameliorating lithocholic acid-induced cholestatic liver injury in mice [J ] . Br J Pharmacol ， 2010 ， 161 （ 5 ）： 1111 - 1121 .

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