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纸质出版:2010
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焦锋,邱际华,张千兵,姚开泰,刘求真.鼻咽癌细胞株侧群细胞染色条件的优化及其表面标记物的测定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(05):499-501.
焦锋, 邱际华, 张千兵, et al. 鼻咽癌细胞株侧群细胞染色条件的优化及其表面标记物的测定[J]. Journal of Army Medical University, 2010, 32(5): 499-501.
焦锋,邱际华,张千兵,姚开泰,刘求真.鼻咽癌细胞株侧群细胞染色条件的优化及其表面标记物的测定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(05):499-501. DOI:
焦锋, 邱际华, 张千兵, et al. 鼻咽癌细胞株侧群细胞染色条件的优化及其表面标记物的测定[J]. Journal of Army Medical University, 2010, 32(5): 499-501. DOI:
目的 探讨鼻咽癌细胞株侧群细胞所需荧光染料Hoechst33342最佳的孵育时间和浓度;研究细胞密度对侧群细胞比例的影响;测定其表面标记物CD133和ABCG2蛋白的表达。 方法 荧光染料Hoechst33342孵育细胞,选择不同的时间(30、60、90、120、150、180 min)及不同的浓度(3、4、5、6、7、8 mg/L),用流式细胞仪检测,倒置荧光显微镜观察选择合适的孵育时间和浓度。选取不同生长密度(70%、100%)的细胞,流式细胞仪检测侧群细胞比例的变化。荧光抗体CD133和ABCG2共孵育Hoechst33342
流式细胞仪测定细胞表面标记物CD133和ABCG2蛋白的表达。 结果 Hoechst33342孵育时间为70 min
侧群细胞染色效果较佳。不同的鼻咽癌细胞株,合适孵育终浓度不同
如CNE2为6 mg/L,而CNE1为2 mg/L。另外,侧群细胞的比例呈生长密度依赖性。CD133蛋白总含量恒定在0.1%~0.2%,侧群细胞和主群细胞表达量没有显著差异,CD133并不富集于侧群细胞中。而侧群细胞ABCG2蛋白较主群细胞优势表达,比例达80%以上。 结论 鼻咽癌细胞株侧群细胞最佳的荧光染料染色时间为70 min,不同细胞株孵育终浓度不同。侧群细胞的比例呈密度依赖,与ABCG2密切相关。
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