利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

刘丽梅; 陈宗涛; 高娜; 田衍平; 陈炜; 张俊磊; 王嘉丽; 安静

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

论著 | 更新时间：2026-01-09

- 利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体
- Preparation of polyclonal antibodies against NS2B of dengue virus serotype 2 by immunization with DNA
- 陆军军医大学学报 2010年32卷第4期页码：327-330
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：
  中图分类号： R392-33;R392.11;R512.8
- 纸质出版：2010
- 稿件说明：
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刘丽梅,陈宗涛,高娜,田衍平,陈炜,张俊磊,王嘉丽,安静.利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(04):327-330.

　Liu Limei,Chen Zongtao,Gao Na,Tian Yanping,Chen Wei,Zhang Junlei,Wang Jiali,An Jing.Preparation of polyclonal antibodies against NS2B of dengue virus serotype 2 by immunization with DNA[J].J Amry Med Univ (J Third Mil Med Univ),2010,32(04):327-330.
刘丽梅,陈宗涛,高娜,田衍平,陈炜,张俊磊,王嘉丽,安静.利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2010,32(04):327-330. DOI：

　Liu Limei,Chen Zongtao,Gao Na,Tian Yanping,Chen Wei,Zhang Junlei,Wang Jiali,An Jing.Preparation of polyclonal antibodies against NS2B of dengue virus serotype 2 by immunization with DNA[J].J Amry Med Univ (J Third Mil Med Univ),2010,32(04):327-330. DOI：

摘要

目的构建登革2型病毒（dengue virus serotype 2

DV2）非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B，进行DNA免疫，制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法 PCR扩增DV2-NS2B基因片段，构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B

采用脂质体介导的方法转染Vero细胞

检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠，制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B，该重组质粒具有良好的免疫原性，免疫小鼠后所获的抗血清，抗体效价达1∶3 200，Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。

Abstract

Objective To construct the eukaryotic expression plasmid pCAGGS-P7/NS2B of dengue virus serotype 2（DV2）NS2B and to prepare mouse anti-NS2B specific polyclonal antibody by immunizing mice with DNA. Methods An eukaryotic expression vector pCAGGS-P7/NS2B was constructed by PCR amplification of the NS2B gene fragment. Vero cells were transfected with lipid-mediated gene. The expression of target protein DV2 NS2B was detected in Vero cells. BALB/c mice were immunized with pCAGGS-NS2B to prepare anti-serum against NS2. Results The pCAGGS-P7/NS2B was constructed with a rather good immunogenicity. The antibody valence of anti-serum obtained from the immunized mice was 1∶3200. Western blotting and indirect immunofluorescence showed that the anti-serum could specifically recognize the DV2-NS2B protein. Conclusion Anti-serum against DV2-NS2 prepared by immunizing mice with DNA can specifically recognize the DV2-NS2B protein.

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