人真核表达质粒载体pcDNA3.1-hOPG的构建及体外表达

唐华; 宫苹; 谭震; 廖大鹏

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人真核表达质粒载体pcDNA3.1-hOPG的构建及体外表达

论著 | 更新时间：2026-01-09

- 人真核表达质粒载体pcDNA3.1-hOPG的构建及体外表达
- Construction of eukaryotic expression bicistron plasmid vector pcDNA3.1-hOPG and its expression in vitro
- 陆军军医大学学报 2007年29卷第23期页码：2240-2242
- 作者机构：
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  中图分类号： R394-33;R394.2
- 纸质出版：2007
- 稿件说明：
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唐华,宫苹,谭震,廖大鹏.人真核表达质粒载体pcDNA3.1-hOPG的构建及体外表达[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2007,29(23):2240-2242.

　TANG Hua,GONG Ping,TAN Zhen,LIAO Da-peng.Construction of eukaryotic expression bicistron plasmid vector pcDNA3.1-hOPG and its expression in vitro[J].J Amry Med Univ (J Third Mil Med Univ),2007,29(23):2240-2242.
唐华,宫苹,谭震,廖大鹏.人真核表达质粒载体pcDNA3.1-hOPG的构建及体外表达[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2007,29(23):2240-2242. DOI：

　TANG Hua,GONG Ping,TAN Zhen,LIAO Da-peng.Construction of eukaryotic expression bicistron plasmid vector pcDNA3.1-hOPG and its expression in vitro[J].J Amry Med Univ (J Third Mil Med Univ),2007,29(23):2240-2242. DOI：

摘要

目的构建表达人骨保护素基因（hOPG）的真核表达质粒pcDNA3.1-hOPG

并检测其在体外的表达，为治疗破骨细胞功能异常引起的骨吸收提供实验基础。方法从MGC:29565上获得hOPG基因片段并用PCR方法扩增，将其连接于真核表达质粒pcDNA3.1(-)，测定序列后，用脂质体包裹转染C

细胞，采用免疫组化和骨吸收抑制实验检测OPG的表达及功能。结果经酶切和测序鉴定证实本实验构建的重组表达质粒正确，该质粒在体外转染C

细胞后可表达功能性OPG蛋白。结论成功构建的pcDNA3.1-hOPG重组质粒能在体外表达OPG蛋白。

Abstract

Objective To construct eukaryotic expression bicistron plasmid vector pcDNA3.1-hOPG

and to detect the expression of the plasmid in vitro. Methods hOPG cDNA fragment was extracted from plasmid MGC:29565

amplified by PCR

and inserted into pcDNA3.1(-) vector

then identified by restriction endonuclease digestion and nucleotide sequencing. C

cells were transfected with the plasmid using Lipofectamine 2000. The expression of OPG protein was detected by immunohistochemistry techniques and bone wafer pit assay. Results The constructed recombinant plasmid contained the sequence of hOPG gene. After transfection with the plasmid

active OPG protein could be expressed in C

ells. Conclusion The constructed eukaryotic expression bicistron plasmid vector pcDNA3.1-hOPG can express OPG in vitro

which is the basis for further study on the treatment of bone absorption caused by abnormal activity of osteoclasts.

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