Effect mechanism of LncRNA MALAT1 on doxorubicin resistance in osteosarcoma cells

LIANG Fudong; DI Shufang; LUO Wei; QI Jianghua; LIU Libing

doi:10.6039/j.issn.1001-0408.2025.06.10

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Effect mechanism of LncRNA MALAT1 on doxorubicin resistance in osteosarcoma cells

更新时间：2025-09-25

- Effect mechanism of LncRNA MALAT1 on doxorubicin resistance in osteosarcoma cells
- ZHONGGUO YAOFANG Vol. 36, Issue 6, Pages: 698-703(2025)
- 作者机构：
  
  甘肃省肿瘤医院骨软一科，兰州　730050
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.6039/j.issn.1001-0408.2025.06.10
  CLC： R979.1+4;R738.1
- Received：27 September 2024，
  
  Revised：2024-10-21，
  
  Accepted：10 February 2025，
  
  Published：30 March 2025
- 稿件说明：
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梁福东,狄淑芳,罗伟,等.LncRNA MALAT1对骨肉瘤细胞阿霉素耐药性的影响机制研究[J].中国药房,2025,36(06):698-703.

LIANG Fudong,DI Shufang,LUO Wei,et al.Effect mechanism of LncRNA MALAT1 on doxorubicin resistance in osteosarcoma cells[J].ZHONGGUO YAOFANG,2025,36(06):698-703.
梁福东,狄淑芳,罗伟,等.LncRNA MALAT1对骨肉瘤细胞阿霉素耐药性的影响机制研究[J].中国药房,2025,36(06):698-703. DOI： 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.06.10.

LIANG Fudong,DI Shufang,LUO Wei,et al.Effect mechanism of LncRNA MALAT1 on doxorubicin resistance in osteosarcoma cells[J].ZHONGGUO YAOFANG,2025,36(06):698-703. DOI： 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.06.10.

摘要

目的

探讨长链非编码RNA（LncRNA）肺腺癌转移相关转录本1（MALAT1）与骨肉瘤（OS）细胞阿霉素（DOX）耐药性的关系及作用机制。

方法

将MG-63和MG-63/DOX细胞用不同浓度DOX（0、0.01、0.05、0.1、1 μmol/L）处理后，以CCK-8法检测其存活率和半数抑制浓度（IC

）；采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测MG-63和MG-63/DOX细胞中LncRNA MALAT1表达。将MG-63/DOX细胞分为Control（对照）组、敲低LncRNA MALAT1的阴性对照（sh-NC）组、sh-MALAT1组、sh-MALAT1+抑制（anti）-NC组、sh-MALAT1+anti-miR-154-5p组。检测各组MG-63/DOX细胞中LncRNA MALAT1、miR-154-5p、细胞周期素D1（CCND1）mRNA相对表达量，采用CCK-8法、划痕实验、Transwell实验、流式细胞仪分别检测敲低LncRNA MALAT1对MG-63/DOX细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响；采用Western blot法检测MG-63/DOX细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）、CCND1蛋白的表达；采用双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA MALAT1与miR-154-5p、miR-154-5p与CCND1之间的相互作用。

结果

与0 μmol/L DOX比较，0.01、0.05、0.1、1 μmol/L DOX均能降低MG-63和MG-63/DOX细胞（0.01 μmol/L DOX除外）的存活率（

＜0.05），IC

分别为0.07、0.13 μmol/L。sh-MALAT1组MG-63/DOX细胞存活率、迁移数、侵袭数、划痕愈合率、LncRNA MALAT1 mRNA表达、CCND 1 mRNA和蛋白表达、PCNA蛋白表达均显著低于sh-NC组、Control组，细胞凋亡率和miR-154-5p表达显著高于sh-NC组、Control组（

＜0.05）；相较于sh-MALAT1组，sh-MALAT1+anti-miR-154-5p组的上述生物学作用均被逆转（

＜0.05）。在转染MALAT1-野生型（WT）和CCND1-WT的MG-63/DOX细胞中，miR-154-5p模拟物（mimic）组的荧光素酶活性均显著低于其阴性

对照组（

＜0.05）。

结论

敲低LncRNA MALAT1可以抑制OS细胞的DOX耐药性，其机制可能是通过靶向miR-154-5p/CCND1轴实现的。

Abstract

OBJECTIVE

To investigate the relationship of long non-coding RNA （LncRNA） metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1 （MALAT1） and doxorubicin （DOX） resistance in osteosarcoma （OS） cells.

METHODS

MG-63 and MG-63/DOX cells were treated with different concentrations of DOX （0， 0.01， 0.05， 0.1， 1 μmol/L）， and survival rates and half maximal inhibitory concentration were determined using CCK-8 assay. The expressions of LncRNA MALAT1 in MG-63 and MG-63/DOX cells were detected by real-time quantitative fluorescence PCR. MG-63/DOX cells were divided into Control group， knocking down LncRNA MALAT1 negative control （sh-NC） group， sh-MALAT1 group， sh-MALAT1+anti-NC group， and sh-MALAT1+anti-miR-154-5p group. The expressions of LncRNA MALAT1， miR-154-5p and cyclin D1 （CCND1） mRNA in MG-63/DOX cells of each group were detected. The effects of knocking down LncRNA MALAT1 on the proliferation， migration， invasion， and apoptosis of MG-63/DOX cells were detected by CCK-8 assay， scratch test， Transwell experiment and flow cytometry， respectively. The expression of proliferating cell nuclear protein （PCNA） and CCND1 protein in MG-63/DOX cells was detected by Western blot assay. Interactions between LncRNA MALAT1 and miR-154-5p， miR-154-5p and CCND1 were detected by dual luciferase reporter gene experiment.

RESULTS

Compared with 0 μmol/L DOX， 0.01， 0.05， 0.1 and 1 μmol/L DOX could reduce the survival rates of MG-63 and MG-63/DOX cells （except for 0.01 μmol/L DOX）（

＜0.05）， IC

were 0.07 and 0.13 μmol/L， respectively. The survival rate， cell migration number and invasion number of MG-63/DOX cells， scratch closure rate， mRNA expressions of LncRNA MALAT1， mRNA and protein expressions of CCND1， and PCNA protein ex

pression in sh-MALAT1 group were significantly lower than sh-NC group and Control group； the apoptosis rate and miR-154-5p expression were significantly higher than sh-NC group and Control group （

＜0.05）. sh-MALAT1+anti-miR-154-5p group was able to reverse the aforementioned biological effects in sh-MALAT1 group （

＜0.05）. In MG-63/DOX cells transfected with both MALAT1-wild type （WT） and CCND1-WT， the luciferase activity in the miR-154-5p mimic group was significantly lower than mimic negative control group （

＜0.05）.

CONCLUSIONS

Knocking down LncRNA MALAT1 can inhibit the DOX resistance of OS cells， and its mechanism may be targeting the miR-154-5p/CCND1 axis.

关键词

Keywords

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