Study on protective effects of Shiyifang medicinal wine on knee osteoarthritis in rabbits based on TLR4/MyD88/NF-кB signaling pathway

ZHANG Wentao; ZHOU Lingmei; HUANG Honghai; BAO Huihui; MAO Dewen; TIAN Hui; LIU Shuling

doi:10.6039/j.issn.1001-0408.2022.18.10

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Study on protective effects of Shiyifang medicinal wine on knee osteoarthritis in rabbits based on TLR4/MyD88/NF-кB signaling pathway

更新时间：2025-09-28

- Study on protective effects of Shiyifang medicinal wine on knee osteoarthritis in rabbits based on TLR4/MyD88/NF-кB signaling pathway
- ZHONGGUO YAOFANG Vol. 33, Issue 18, Pages: 2224-2229(2022)
- 作者机构：
  
  1.广西中医药大学教学实验实训中心，南宁　530200
  2.广西中医药大学药学院，南宁　530200
  3.广西中医药大学第一附属医院肝病科，南宁　530023
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.6039/j.issn.1001-0408.2022.18.10
  CLC： R965
- Received：09 January 2022，
  
  Revised：2022-06-06，
  
  Published：30 September 2022
- 稿件说明：
移动端阅览
张文涛,周玲梅,黄宏海,等.基于TLR4/MyD88/NF-кB信号通路研究十一方药酒对兔膝骨关节炎的保护作用[J].中国药房,2022,33(18):2224-2229.

ZHANG Wentao,ZHOU Lingmei,HUANG Honghai,et al.Study on protective effects of Shiyifang medicinal wine on knee osteoarthritis in rabbits based on TLR4/MyD88/NF-кB signaling pathway[J].ZHONGGUO YAOFANG,2022,33(18):2224-2229.
张文涛,周玲梅,黄宏海,等.基于TLR4/MyD88/NF-кB信号通路研究十一方药酒对兔膝骨关节炎的保护作用[J].中国药房,2022,33(18):2224-2229. DOI： 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.18.10.

ZHANG Wentao,ZHOU Lingmei,HUANG Honghai,et al.Study on protective effects of Shiyifang medicinal wine on knee osteoarthritis in rabbits based on TLR4/MyD88/NF-кB signaling pathway[J].ZHONGGUO YAOFANG,2022,33(18):2224-2229. DOI： 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.18.10.

摘要

目的

研究十一方药酒（以下简称“SYF”）对木瓜蛋白酶诱导的兔膝骨关节炎（KOA）的保护作用及机制。

方法

将35只兔随机分为空白组、模型组、阳性组（双氯芬酸二乙胺乳胶剂200 mg/kg）、SYF高剂量组（386 mg/kg）、SYF低剂量组（97 mg/kg），每组 7 只（均为雄性4只、雌性3只）。除空白组外，其余各组兔于第 1、4、7天从右后肢膝关节腔注入木瓜蛋白酶混合液（含2%木瓜蛋白酶与0.03 mol/L L-半胱氨酸）0.5 mL复制KOA模型，空白组注射等体积生理盐水。从第15天开始于各组兔右后肢膝关节涂抹药物，每天给药2次，连续20 d，同时在第0、8、14、35天，用游标卡尺测量兔右后肢膝关节直径计算其肿胀度。实验结束后，采用酶联免疫吸附测定法检测滑膜组织白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、前列腺素E

（PGE

）的水平；制作滑膜组织苏木精-伊红（HE）染色切片，观测病理学形态变化；采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测滑膜组织Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/细胞核因子（NF-кB）信号通路中TLR4、MyD88、NF-кB p65 mRNA相对表达水平；采用Western blot法检测滑膜组织TLR4、MyD88、NF-кB p65、磷酸化NF-кB p65（p-NF-кB p65）蛋白相对表达水平。

结果

与空白组比较，模型组兔膝关节肿胀度升高，滑膜组织病理性损伤严重，滑膜组织中IL-1β、TNF-α、PGE

水平均显著升高（

＜0.05），TLR4、MyD88、NF-кB p65 mRNA和TLR4、MyD88、p-NF-кB p65蛋白相对表达水平均显著升高（

＜0.05）。与模型组比较，各给药组兔右后肢膝关节肿胀度与滑膜组织病理损伤程度均有显著改善，滑膜组织中IL-1β、TNF-α、PGE

水平均显著降低（

＜0.05），TLR4、MyD88、NF-кB p65 mRNA相对表达水平和TLR4、MyD88（SYF低剂量组除外）、p-NF-кB p65蛋白相对表达水平均显著降低（

＜0.05）。

结论

SYF对木瓜蛋白酶诱导的兔KOA有保护作用，其作用机制与降低炎症因子IL-1β、TNF-α、PGE

水平及下调TLR4/MyD88/NF-кB信号通路相关。

Abstract

OBJECTIVE

To study the protective effect and mechanism of Shiyifang medicinal wine （SYF） on knee osteoarthritis （KOA） of rabbit induced by papain.

METHODS

Thirty-five rabbits were randomly divided into blank group， model group， positive group （Diclofenac diethylamine emulsion 200 mg/kg）， SYF high-dose group （3

86 mg/kg） and SYF low-dose group （97 mg/kg）， with 7 rabbits in each group （all had 4 males and 3 females）. Except for the blank group， the other groups’ rabbits were injected 0.5 mL papain mixture （containing 2% papain and 0.03 mol/L L-cysteine） into the right knee cavity on day 1， 4 and 7， to replicate KOA model. Blank group was given constant volume of normal saline. From the 15th day， drugs were applied to right hind knee joints of rabbits in each group， twice a day for 20 days. At the same time， the diameter of right knee joints of rabbits was measured by vernier calipers at day 0， 8， 14 and 35 to calculate swelling degree. After the experiment， the levels of IL-1β， TNF-α and PGE

in synovial tissue were determined by enzyme-linked immunosorbent assay. Hematoxylin-eosin （HE） staining was used to prepare the sections of synovial tissue， and the pathological changes were observed. The relative mRNA expressions of TLR4， MyD88 and NF-кB p65 in the TLR4/MyD88/NF-кB signaling pathway were detected by real-time quantitative polymerase chain reaction.The relative protein expressions of TLR4， MyD88， NF-кB p65 and p-NF-кB p65 were detect by Western blot.

RESULTS

Compared with blank group， the degree of knee swelling could be increased in model group， the pathological damage of synovial tissue was more serious， and the levels of IL-1β， TNF-α and PGE

were increased significantly in synovial tissue （

＜0.05）. The relative expression levels of TLR4， MyD88， NF-кB p65 mRNAs and TLR4， MyD88， p-NF-кB p65 proteins were significantly increased （

＜0.05）. Compared with model group， swelling degree of right hind knee and the pathological injury degree of synovial tissue were significantly improved in each treatment group， while the levels of IL-1β， TNF-α and PGE

in synovial tissue were significantly decreased （

＜0.05）. The relative mRNA expressions of TLR4， MyD88 and NF-кB p65 and relative protein expressions of TLR4，

MyD88 （except for SYF low-dose group）and p-NF-кB p65 were all significantly decreased （

＜0.05）.

CONCLUSIONS

SYF shows protective effect on KOA induced by papain， the mechanism of which is associated with decreasing the levels of IL-1β， TNF-α and PGE

and down-regulating TLR4/MyD88/NF-кB signaling pathway.

关键词

Keywords

references

邱贵兴 . 骨关节炎诊治指南：2007年版 [J ] . 中华骨科杂志， 2007 ， 27 （ 10 ）： 793 - 796 .

杨辉 . 两种不同手术方式治疗对老年膝关节骨性关节炎患者功能恢复及血清IL-1 IL-17 ESR水平的影响 [J ] . 河北医学， 2021 ， 27 （ 12 ）： 2061 - 2065 .

刘朝晖，马剑雄，张顺，等 . 膝骨关节炎的现状及治疗方法的研究进展 [J ] . 中华骨与关节外科杂志， 2020 ， 13 （ 8 ）： 688 - 693 .

郭跃，杨青梅，鲁超，等 . 膝骨性关节炎的中医证候特点研究 [J ] . 中医临床研究， 2015 ， 7 （ 4 ）： 1 - 4 .

梅其杰，徐文飞，段戡，等 . 十一方药酒涂擦结合艾瑞昔布片治疗膝骨关节炎的临床疗效观察 [J ] . 中国中医骨伤科杂志， 2021 ， 29 （ 10 ）： 43 - 46 .

梁春恒，谢杏花，洪光，等 . 十一方酒+地塞米松+利多卡因离子导入治疗腰椎间盘突出症患者的效果观察 [J ] . 中外医学研究， 2021 ， 19 （ 5 ）： 16 - 18 .

胡清军，付杰，刘武，等 . 关节镜下微骨折技术结合术后十一方药酒外涂治疗膝关节软骨损伤的疗效观察 [J ] . 广西中医药大学学报， 2012 ， 15 （ 4 ）： 19 - 20 .

潘勇才，彭镇耀 . 跌打止痛散与十一方酒外敷治疗软组织损伤临床研究 [J ] . 中国医药导刊， 2009 ， 11 （ 7 ）： 1225 - 1226 .

田慧，韦林利，曾昭清，等 . 多指标综合加权评分法优选十一方药酒渗漉提取工艺研究 [J ] . 中药材， 2021 ， 44 （ 5 ）： 1199 - 1201 .

孙鲁宁，黄桂成，赵燕华，等 . 木瓜蛋白酶诱导兔膝关节骨关节炎模型滑膜中白细胞介素1、白细胞介素6、白三烯浓度变化与药物注射时间的关系 [J ] . 中国组织工程研究， 2012 ， 16 （ 33 ）： 6184 - 6188 .

沈鹏，王腾腾，张浩，等 . 芪防膝痹颗粒对大鼠膝骨关节炎疼痛的影响 [J ] . 中华中医药杂志， 2019 ， 34 （ 9 ）： 3990 - 3994 .

陈人智，王明磊，朱凯，等 . 管型石膏伸直位固定法对兔KOA模型膝关节X线及MRI检查改变的研究 [J ] . 宁夏医科大学学报， 2019 ， 41 （ 5 ）： 446 - 449 .

张劲，赵亮，胡春生 . 新型外固定支具建立兔膝骨性关节炎模型的研究 [J ] . 湖北中医药大学学报， 2015 ， 17 （ 4 ）： 8 - 9 .

汪宗保，徐亚林，廖威明，等 . 木瓜蛋白酶诱导大鼠膝早期骨关节炎软骨表面的电镜扫描 [J ] . 中国组织工程研究， 2014 ， 18 （ 2 ）： 177 - 182 .

何俊君，黄泽灵，张应生，等 . 早期骨关节炎动物模型的建立与评价 [J ] . 中国骨与关节损伤杂志， 2019 ， 34 （ 4 ）： 358 - 360 .

张文贤，张晓刚 . 骨性关节炎的实验研究进展 [J ] . 中国中医骨伤科杂志， 2003 ， 11 （ 6 ）： 51 - 54 .

胥少汀，葛宝丰，徐印坎 . 实用骨科学 [M ] . 3版 . 北京：人民军医出版社， 2006 ： 1338 - 1339 .

黄媛霞，徐海斌，郭春 . IL-1β和MMP-13在兔骨关节炎模型软骨和滑液中的表达 [J ] . 西安交通大学学报（医学版）， 2017 ， 38 （ 4 ）： 507 - 511，528 .

陈兴华，黄珍谷，王棚，等 . 葛根素通过调控炎性因子抑制兔膝关节骨性关节炎的研究 [J ] . 安徽医药， 2017 ， 21 （ 2 ）： 230 - 234 .

BAKER K ， GRAINGER A ， NIU J ， et al . Relation of synovitis to knee pain using contrast-enhanced MRIs [J ] . Ann Rheum Dis ， 2010 ， 69 （ 10 ）： 1779 - 1783 .

刘姣，曲崇正，谢平金，等 . 膝骨性关节炎模型大鼠接受推拿治疗后软骨Toll样受体4/髓样分化因子88信号转导通路的变化 [J ] . 中国组织工程研究， 2019 ， 23 （ 19 ）： 3019 - 3024 .

庄宁彤，赵冬久，史丽云 . Toll样受体4（TLR4）的内吞通路及其调控机制研究进展 [J ] . 细胞与分子免疫学杂志， 2016 ， 32 （ 11 ）： 1574 - 1578 .

YU J E ， KNIGHT A K ， RADIGAN L ， et al . Toll-like receptor 7 and 9 defects in common variable immunodeficiency [J ] . J Allergy Clin Immunol ， 2009 ， 124 （ 2 ）： 349 - 356.e3 .

DI DOMIZIO J ， BLUM A ， GALLAGHER-GAMBARELLI M ， et al . TLR7 stimulation in human plasmacytoid dendritic cells leads to the induction of early IFN-inducible genes in the absence of type Ⅰ IFN [J ] . Blood ， 2009 ， 114 （ 9 ）： 1794 - 1802 .

KONNO H ， YAMAMOTO T ， YAMAZAKI K ， et al . TRAF6 establishes innate immune responses by activating NF-kappaB and IRF7 upon sensing cytosolic viral RNA and DNA [J ] . PLoS One ， 2009 ， 4 （ 5 ）： e5674 .

Views

147

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

No data

Related Author

No data

Related Institution

No data

⁰