NK细胞特异性敲除UTX以性别差异方式调控黑色素瘤肺转移

HUANG Pei; WANG Hongchen; HUANG He; XIE Jiaxin; WU Yu; ZHOU Simin; LIAO Xinyi; GUAN Xiao

doi:10.16016/j.2097-0927.202411078

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NK细胞特异性敲除UTX以性别差异方式调控黑色素瘤肺转移

Basic Medicine | 更新时间：2025-04-25

- NK细胞特异性敲除UTX以性别差异方式调控黑色素瘤肺转移
- Journal of Army Medical University Vol. 47, Issue 8, Pages: 807-815(2025)
- 作者机构：
  
  1.陆军军医大学（第三军医大学）：，高原军事医学系高原作业医学教研室，重庆
  2.陆军军医大学（第三军医大学）：，药学与检验医学系临床血液学教研室，重庆
  3.联勤保障部队第九四〇医院神经内科，甘肃兰州
  4.重庆医药高等专科学校，重庆
- 作者简介：
  
  GUAN Xiao， E-mail： 343482960@qq.com
- 基金信息：
  
  the National Natural Science Foundation for Young Scholars of China(82204398);the General Project of Natural Science Foundation of Chongqing(CSTB2022NSCQ-MSX0410);the Young Reserve Project of Top Talent Cultivation Program of No. 940 Hospital of Joint Logistic Support Force(2024-G3-6)
- DOI：10.16016/j.2097-0927.202411078
  CLC： R73-362;R734.2;R739.5
- Received：18 November 2024，
  
  Revised：04 March 2025，
  
  Published：30 April 2025
- 稿件说明：
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黄沛,王洪晨,黄河,等.NK细胞特异性敲除UTX以性别差异方式调控黑色素瘤肺转移[J].陆军军医大学学报,2025,47(08):807-815.

HUANG Pei,WANG Hongchen,HUANG He,et al.NK cell-specific knockout of UTX modulates pulmonary metastasis of melanoma in a sex-dependent manner[J].J Army Med Univ,2025,47(08):807-815.
黄沛,王洪晨,黄河,等.NK细胞特异性敲除UTX以性别差异方式调控黑色素瘤肺转移[J].陆军军医大学学报,2025,47(08):807-815. DOI：10.16016/j.2097-0927.202411078.

HUANG Pei,WANG Hongchen,HUANG He,et al.NK cell-specific knockout of UTX modulates pulmonary metastasis of melanoma in a sex-dependent manner[J].J Army Med Univ,2025,47(08):807-815. DOI：10.16016/j.2097-0927.202411078.

摘要

目的

探究X染色体编码的表观调节因子UTX对自然杀伤（natural killer，NK）细胞抗肿瘤活性的调控作用。

方法

采用

Ncr1-iCre

工具雄鼠与

UTX

fl/fl

雌鼠杂交，获得F1代

Ncr1-iCre

UTX

fl/-

雄鼠，进而将F1代小鼠与

UTX

fl/fl

雌鼠杂交，获得对照雄鼠

Ncr1-iCre

UTX

fl/-

（M-对照）和NK细胞特异性敲除UTX雄鼠

Ncr1-iCre

UTX

fl/-

（M-敲除）；以及对照雌鼠

Ncr1-iCre

UTX

fl/fl

（F-对照）和UTX基因敲除雌鼠

Ncr1-iCre

UTX

fl/fl

（F-敲除）。UTX基因敲除小鼠通过尾静脉注射黑色素瘤细胞B16F10，观察肺脏转移的肿瘤结节数量；并通过流式细胞术分析肺脏NK细胞比例（CD3

CD19

NK1.1

）、数量、成熟分子KLRG1和CD11b、表达活化受体NKG2D和CD69及效应分子穿孔素、颗粒酶B、CD107a和干扰素-γ（interferon-γ， IFN-γ）的改变；继而将分选的NK细胞与B16F10细胞共培养，通过流式细胞术检测B16F10细胞凋亡的改变。

结果

与M-对照雄鼠相比较，M-敲除雄鼠肺脏黑色素瘤结节数量显著减少（

0.05）；肺脏NK细胞比例和数量均显著增加（

0.01）；NK细胞成熟标志分子KLRG1和CD11b比例无显著改变；NK细胞毒性分子穿孔素表达增加（

0.01），而效应分子颗粒酶B、脱颗粒标志分子CD107a，以及细胞因子IFN-γ无统计学差异；NK细胞与B16F10细胞共培养导致肿瘤细胞凋亡显著增加（

0.05）。相比于F-对照雌鼠，F-敲除雌鼠肺脏黑色素瘤结节数量无统计学差异；肺脏NK细胞比例和数量显著增加（

0.05）；KLRG1和CD11b比例显著减少（

0.01）；NK细胞穿孔素表达增加，颗粒酶B、CD107a和IFN-γ表达均显著减少（

0.01）；NK细胞与B16F10细胞共培养，肿瘤细胞凋亡显著减少（

0.05）。

结论

NK特异性敲除UTX以性别差异方式调控小鼠黑色素瘤肺转移。

Abstract

Objective‍　‍To explore the role of X chromosome encoded epigenetic regulator UTX in NK cell-mediated anti-tumor activity. Methods‍　‍Male

Ncr1-iCre

mice were crossed with female

UTX

fl/fl

mice to generate F1

Ncr1-iCre

UTX

fl/-

male mice

which were further crossed with female

UTX

fl/fl

mice to obtain male

Ncr1-iCre

UTX

fl/-

control mice (M-Con) and NK-specific deletion of UTX male mice

Ncr1

iCre

UTX

fl/-

(M-KO)

as well as female

Ncr1-iCre

UTX

fl/fl

control mice (F-Con) and UTX-deficient female mice

Ncr1

iCre

UTX

fl/fl

(F-KO). UTX-deficient mice were injected with melanoma cell line B16F10

via

tail vein to observe pulmonary metastatic tumor nodules. Moreover

flow cytometry was applied to detect the proportion and quantity of pulmonary NK cells (CD3

CD19

NK1.1

)

maturation makers KLRG1 and CD11b

activation receptors NKG2D and CD69

and effector molecules

including perforin

granzyme B

CD107a

and IFN-γ. Then pulmonary NK cells were sorted and co-cultured with B16F10 cells

and the apoptosis of the melanoma cells was measured with flow cytometry. Results‍　‍Compared with the M-Con mice

the M-KO

mice presented less number of pulmonary tumor nodules (

0.05)

increased proportion and quantity of NK cells in the tumor microenvironment (

0.01)

though no obvious changes in the ratio of NK maturation makers KLRG1 to CD11b

enhanced expression level of cytotoxic

molecule perforin (

0.01)

but no changes in the expression of effector molecule granzyme B

degranulation marker CD107a and cytokine IFN-γ in NK cells. Co-culture of NK cells and B16F10 cells promoted the apoptosis of tumor cells (

0.05). Compared with the F-Con mice

the F-KO mice had no statistical difference in the number of pulmonary tumor nodules

but larger proportion and number of NK cells (

0.05)

decreased ratio of KLRG1 to CD11b (

0.01)

elevated level of perforin but decreased levels of granzyme B

CD107a and IFN-γ in NK cells (

0.01). The co-culture of NK cells and B16F10 cells reduced the apoptosis of tumor cells in F-KO

female mice (

0.05). Conclusion‍　‍NK-specific deletion of UTX regulates pulmonary metastasis of melanoma in a sex-dependent manner.

关键词

Keywords

references

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