人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定

蔡震; 梁自文; 罗向东; 杨宗城; 孙荣距

doi:10.16016/j.1000-5404.2004.23.010

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人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定

更新时间：2026-01-09

- 人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定
- Journal of Army Medical University Vol. 26, Issue 23, (2004)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.23.010
  CLC： R346
- Online First：15 December 2004，
  
  Published：2004
- 稿件说明：
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蔡震,梁自文,罗向东,杨宗城,孙荣距,人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(23):0-.

蔡震, 梁自文, 罗向东, et al. 人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(23).
蔡震,梁自文,罗向东,杨宗城,孙荣距,人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(23):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.23.010

蔡震, 梁自文, 罗向东, et al. 人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(23). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2004.23.010.

摘要

目的　获得内皮高表达脂多糖相关因子 1(eola1)表达蛋白并对其进行分析鉴定。方法　采用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)的方法从人ECV 3 0 4细胞中扩增出eola1基因开放阅读框

构建重组质粒

测序鉴定后转化大肠杆菌

IPTG诱导表达

裂解细菌抽提蛋白

目的蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)、Western免疫印迹鉴定。结果　测序鉴定eola1开放阅读框成功插入PET 46 EK LIC质粒 ;重组质粒在大肠杆菌中成功表达人eola1蛋白

主要以包涵体形式存在

聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)测定其分子质量约 2 0× 10 3

Westernblot验证出目的蛋白特异表达。结论　应用原核表达系统能够成功获得目的蛋白

为下一步制备eola1单克隆抗体及基因功能研究打下基础。

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