人趋化因子SLC原核表达载体的构建与表达

罗福康; 郑红; 何凤田

doi:10.16016/j.1000-5404.2004.14.002

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人趋化因子SLC原核表达载体的构建与表达

更新时间：2026-01-09

- 人趋化因子SLC原核表达载体的构建与表达
- Journal of Army Medical University Vol. 26, Issue 14, (2004)
- 作者机构：
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.14.002
  CLC： R392
- Online First：30 July 2004，
  
  Published：2004
- 稿件说明：
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罗福康,郑红,何凤田,人趋化因子SLC原核表达载体的构建与表达[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(14):0-.

罗福康, 郑红, 何凤田. 人趋化因子SLC原核表达载体的构建与表达[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(14).
罗福康,郑红,何凤田,人趋化因子SLC原核表达载体的构建与表达[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(14):0-. DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.14.002

罗福康, 郑红, 何凤田. 人趋化因子SLC原核表达载体的构建与表达[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(14). DOI： 10.16016/j.1000-5404.2004.14.002.

摘要

目的　构建趋化因子SLC(secondarylymphoid tissuechemokine)的硫氧还蛋白融合表达载体并表达融合蛋白。方法　从人扁桃体中提取总RNA

再进行RT PCR

扩增SLC成熟蛋白基因

并在 5’和 3′分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点

通过这两个酶切位点重组于pET3 2a( +)载体上

转化E .coliDH5α

筛选阳性克隆

酶切鉴定

DNA测序检测插入序列的正确性

经突变删除因NcoⅠ位点引入而在肠激酶位点和目的基因间多余的 3个氨基酸

DNA再测序检测突变结果

SDS PAGE分析其表达

并通过金属离子亲和层析、除盐、弱阳离子交换层析

得到纯化的融合蛋白

Westernblot验证纯化的融合蛋白。结果　成功构建了SLC天然蛋白的硫氧还蛋白融合表达载体

表达并纯化出融合蛋白

Westernblot证明该融合蛋白能与羊抗人SLC一抗结合。结论　构建的天然SLC硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式稳定表达SLC硫氧还蛋白

并对融合蛋白进行了初步纯化

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