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Online First:30 May 2004,
Published:2004
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胡承香,杨清武,吕凤林,徐祥,CD14与TLR4相互作用的实验研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(10):0-.
胡承香, 杨清武, 吕凤林, et al. CD14与TLR4相互作用的实验研究[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(10).
胡承香,杨清武,吕凤林,徐祥,CD14与TLR4相互作用的实验研究[J].陆军军医大学学报(原第三军医大学学报),2004,26(10):0-. DOI:10.16016/j.1000-5404.2004.10.014
胡承香, 杨清武, 吕凤林, et al. CD14与TLR4相互作用的实验研究[J]. Journal of Army Medical University, 2004, 26(10). DOI: 10.16016/j.1000-5404.2004.10.014.
目的 探讨CD14与TLR4(toll likereceptor 4
TLR4)在介导LPS膜信号转导中的相互作用。方法 通过PCR分别克隆CD14cDNA和TLR4胞外区cDNA
构建其酵母表达载体
将载体共转化酵母细胞行酵母双杂交实验。同时
应用Pull down和免疫共沉淀实验在体外及体内进一步鉴定CD14与TLR4的相互作用。结果 PCR扩增获得了CD14cDNA和TLR4胞外区cDNA
并成功地构建了pGADT7AD CD14和pGBKT7BD TLR4酵母双杂交质粒。酵母双杂交系统检测显示pGADT7AD CD14和pGBKT7BD TLR4质粒均无自主激活报告基因LacZ表达的能力
在酵母细胞中CD14和TLR4之间存在相互作用。Pull down结果也显示
在体外反应体系中
CD14和TLR4间存在相互作用。免疫共沉淀实验结果表明
在哺乳动物细胞 (HEK 2 93 )这一体内反应体系中
CD14与TLR4间也存在交互作用。结论 在酵母细胞、体外反应体系和哺乳动物细胞 (HEK 2 93 )中
CD14与TLR4之间存在物理上的相互作用
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